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甲苯胺藍染色液(1%,磷酸鹽法)
產品貨號:R21638
產品規(guī)格:100ml/500ml
產品簡介:
甲苯胺藍(Toluidine Blue O)是一種常用的人工合成染料, 屬于醌亞胺染料類, 這類染料主要含有胺基和醌型 苯環(huán)兩個發(fā)色團,從而成色原顯色。甲苯胺藍中的陽離子有染色作用,組織細胞的酸性物質與其中的陽離子相結 合而被染色。甲苯胺藍還含有兩個助色團,能促使染料產生電離成鹽類, 幫助發(fā)色團對組織產生染色力, 使切片 上的組織細胞著色,可染細胞核使之呈藍色。另外,肥大細胞胞質內含有肝素和組織胺等異色性物質,遇到甲苯 胺藍可呈異染性紫紅色。臨床上,經常用甲苯胺藍對軟骨細胞和肥大細胞進行染色。
產品組成:
試劑名稱 規(guī)格 保存條件 甲苯胺藍染色液(1%,磷酸鹽法) 100ml/500ml 室溫,避光
操作步驟(僅供參考):
(一)肥大細胞染色
1. 脫蠟至蒸餾水。
2. 根據(jù)切片厚度和組織的不同,浸染于甲苯胺藍染色液 5~30min。
3. 蒸餾水或去離子水輕輕沖洗 3~5min。
4. (可選)0.5%冰乙酸分化,直到細胞核和顆粒清晰可見。
5. 快速 95%和無水乙醇脫水。
6. 二甲苯透明,封固。 染色結果:肥大細胞呈紫紅色;背景呈淡藍色。
(二)軟骨染色
1. 石蠟切片入二甲苯 2 次,每次 15min。
2. 系列乙醇各 1min。
3. 自來水洗 2min。
4. 入 Toluidine Blue O Stain,浸染 10~15min。
5. 自來水洗 2min,濾紙吸干水分。
6. 丙酮分化至軟骨細胞呈紫藍色清楚可見。
7. 逐級乙醇脫水。
8. 二甲苯透明,中性樹膠封固。
染色結果:
軟骨、成骨細胞呈紫紅色;背景呈淡藍色。
(三)細胞涂片染色
1. 用 20%的乙醇溶液稀釋甲苯胺藍染色液 , 一般要求稀釋到 0.1%即可。
2. 細胞涂片后,立即放入 95%的乙醇中固定 15s,取出放在紙巾上。
3. 滴加 1~2 滴稀釋后的甲苯胺藍染色液進行滴染,加蓋玻片讓染料滲透到細胞中。
4. 10~15s 后將玻片豎起,稍加壓力,使多余染料被紙巾吸去。
5. 無需干燥,直接鏡檢。 染色結果:細胞核、淋巴細胞呈深藍色;核仁呈紫紅色;紅細胞呈橘紅;細胞質、單核細胞呈淡藍色。
(四)原位雜交染色
1. 用蒸餾水或去離子水稀釋到相應的濃度,憑經驗一般稀釋比例大于 1:100。
2. 玻片在稀釋好的染色液中短暫浸泡。
3. 在蒸餾水或去離子水浸泡數(shù)次。
4. 按需求進行壓片固定。
注意事項:
1. 針對于胃粘膜組織、軟骨組織等較難著色組織的染色,浸染于甲苯胺藍染色液的時間應相應延長。
2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:12 個月有效。
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