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Carazzi 蘇木素染色液
產(chǎn)品貨號(hào):G3212
產(chǎn)品規(guī)格:100ml/500ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡(jiǎn)稱 HE 染色,是病理學(xué)和組織學(xué)常用的一種染色方法。蘇木 精為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的主要成分是 DNA,在 DNA 的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷 酸鏈上的磷酸基向外,使 DNA 雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵 或氫鍵結(jié)合而被染色。
Leagene Delafield 蘇木素染液非常穩(wěn)定,成熟后密封可保存 2 年。對(duì)核染色質(zhì)染得很清晰細(xì)致,染色時(shí)間也 稍長(zhǎng)。適用于教學(xué)和科研上的制片染色,用此染色液對(duì)冷凍切片染色則不理想。
染色原理:
1、 細(xì)胞核染色的原理:
蘇木素為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是 DNA,在 DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩 條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使 DNA 雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以 離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。
2、 細(xì)胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,在一定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合 物,細(xì)胞漿的染色與染液的 pH 值密切相關(guān)。當(dāng)染液的 pH 值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7~5.0)以下時(shí),胞漿蛋白質(zhì) 以堿式電離,則細(xì)胞漿帶正電荷,就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與胞 漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合,使細(xì)胞漿著色,呈現(xiàn)紅色。
3、 分化作用:
染色后,用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,這個(gè)過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。 在 HE 染色中常用鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),使組織與色素分離而退色。經(jīng)蘇木素染 色后,必須用鹽酸乙醇分化,使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木素染料脫去,再進(jìn)行伊紅染色, 才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。
4、 返藍(lán)作用:
分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),呈藍(lán)色。組 織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,故分化之后,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性 水使蘇木素染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,這個(gè)過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán), 但所需時(shí)間較長(zhǎng)。
產(chǎn)品組成:
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
---|---|---|
Delafield蘇木素染色液 | 100ml/500ml | 室溫,避光 |
自備材料:
1. 鹽酸乙醇分化液
2. 藍(lán)化液,如稀氨水、碳酸鋰溶液等
3. 系列乙醇
4. 伊紅染色液
5. 4%多聚甲醛
操作步驟:
(一) 石蠟切片染色
1. 切片脫蠟至水
① 二甲苯作用。
② (可選)無水乙醇作用。
③ 95%的乙醇
④ 90%的乙醇
⑤ 80%的乙醇
⑥ 自來水或蒸餾水沖洗
2. 染色
① Delafield 蘇木素染色液染色
② 自來水或蒸餾水沖洗
③ (可選)鹽酸乙醇分化
④ 自來水沖洗
⑤ (可選)藍(lán)化液返藍(lán)
⑥ 自來水沖洗
⑦ 伊紅染色液染色
注意事項(xiàng):
1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。系列乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液。
2. 鹽酸乙醇分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織類別以及新舊而定,另外分化后自來水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠,以便徹 底清洗酸。
3. 藍(lán)化液常使用 0.2~1%氨水或 Scott 促藍(lán)液或 0.1~1%碳酸鋰溶液。
4. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:24個(gè)月有效。
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