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革蘭氏染色液試劑盒
產(chǎn)品貨號:R21631
產(chǎn)品規(guī)格:4×100ml
產(chǎn)品簡介:
革蘭氏染色液試劑盒是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復合物,革蘭氏陽性菌細胞壁較厚,肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,乙醇脫色時,肽聚糖脫水使孔徑縮小,故保留結(jié)晶紫-碘復合物在細胞膜上,呈紫色。革蘭氏陰性菌細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,脫色后類脂外膜迅速溶解,縫隙加大,結(jié)晶紫與碘復合物溶出,因此乙醇脫 色后再經(jīng)番紅復染,呈紅色。
產(chǎn)品內(nèi)容:
產(chǎn)品名稱 | 包裝 | 儲存條件 |
結(jié)晶紫染色液 | 100ml | 2-8℃,避光 |
番紅染色液 | 100ml | 2-8℃,避光 |
碘液 | 100ml | 2-8℃,避光 |
95%酒精 | 100ml | 室溫 |
操作步驟:
1. 涂片固定:菌液涂片時不可過于濃厚,干燥、固定。固定時通過火焰1-2次即可,不可過熱,以載玻片不燙手為宜。
2. 染色:一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,具體操作方法是:
(1) 加上結(jié)晶紫后,染色1分鐘,水洗。
(2) 加上碘液后染色1分鐘,水洗。
(3) 加上95%酒精,搖動玻片,根據(jù)涂片厚度,脫色約20-60秒,水洗,吸去水分。
(4) 加上番紅后,染色1分鐘,水洗。
(5) 吸干或在空氣中涼干后,油鏡鏡檢。
革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴格掌握酒精脫色程度,如脫色過度,則陽性菌可被誤染為陰性菌;而脫色不夠時,陰性菌可被誤染為陽性菌。此外,菌齡也影響染色結(jié)果,如陽性菌培養(yǎng)時間過長,或已死亡及部分菌體自行溶解,都常呈陰性反應(yīng)。
3. 結(jié)果觀察:革蘭氏陰性菌呈紅色,革蘭氏陽性菌呈紫色。以均勻分散開的細菌的革蘭氏染色反應(yīng)為準,過于密集的細菌,常常呈現(xiàn)假陽性。
注意事項:
1. 標本涂片不能太厚,嚴格按操作要求進行。若涂片較厚,應(yīng)延長脫色時間,直至不再出現(xiàn)紫色為止。
2. 玻片通過火焰溫度不能太高。
3. 碘液變透明,則不能使用。
4. 水洗時動作要輕柔,沿載玻片對角線方向用洗瓶沖洗,以免把菌體沖掉。
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