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DNA產(chǎn)物純化試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):27100
產(chǎn)品規(guī)格:50次/100次/200次
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
DNA產(chǎn)物純化試劑盒采用新型硅基質(zhì)膜技術(shù)和試劑配方,通過快速簡(jiǎn)單的結(jié)合-洗滌-洗脫三步即可從PCR產(chǎn)物或酶反應(yīng)液(酶切,連接,探針標(biāo)記等)中純化回收70 bp-30 kb的DNA片段,每個(gè)吸附柱最高可吸附10μg的DNA,同時(shí)最大限度的去除引物、寡核苷酸、酶等雜質(zhì)。純化回收的DNA純度及濃度高,完整性好,回收率高,可直接用于測(cè)序、連接和轉(zhuǎn)化、標(biāo)記、體外轉(zhuǎn)錄等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
包裝清單:
產(chǎn)品名稱 | 50次 | 100次 | 200次 | 儲(chǔ)存條件 |
Buffer PG | 15ml | 30ml | 55ml | 室溫 |
Buffer PS | 15ml | 25ml | 45ml | 室溫 |
Buffer PW | 10ml | 18ml | 36ml | 室溫 |
Buffer EB | 5ml | 10ml | 20ml | 室溫 |
Spin Columns | 50個(gè) | 100個(gè) | 200個(gè) | 室溫 |
Collection Tubes | 50個(gè) | 100個(gè) | 200個(gè) | 室溫 |
自備試劑:50次自備36ml無水乙醇/100次自備72ml無水乙醇/100次自備144ml無水乙醇
操作步驟:
1. 將估計(jì)DNA反應(yīng)液的體積,加入5倍體積的 Buffer PG,充分混勻(無需去除石蠟油或礦物油)。
注意:如DNA反應(yīng)體系為50µl(不包括石蠟油體積),則加入250 µl Buffer PG。
2. 柱平衡:向已裝入收集管(Collection Tubes)中的吸附柱(Spin Columns)中加入200μl Buffer
3. PS,12000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
4. 將步驟3或4所得溶液加入到已裝入收集管的吸附柱中,室溫放置2分鐘,12000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。
5. 向吸附柱中加入450 μl Buffer PW(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇),12000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。
注意:如果純化的DNA用于鹽敏感的實(shí)驗(yàn)(例如平末端連接或直接測(cè)序),建議加入Buffer PW靜置2-5分鐘再離心。
6. 重復(fù)步驟4。
7. 12000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液。
注意:這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除,乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶促反應(yīng)(酶切、PCR等)。
將吸附柱放到一個(gè)新的1.5 ml離心管(自備)中,向吸附膜中間位置懸空滴加50μlBuffer EB,室溫放置2分鐘。12000 rpm離心1分鐘,收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意事項(xiàng):
1. 第一次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在Buffer PW中加入無水乙醇。
2. 所有離心步驟均可室溫下進(jìn)行。
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