大腸桿菌基因組DNA提取試劑盒（CTAB沉淀法）

產(chǎn)品貨號：11020

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡介：

大腸桿菌( Escherichia coli,E.coli)屬于革蘭氏陰性短桿菌,大小0.5×1~3微米周生鞭毛,能運動,無芽孢,能發(fā)酵多種糖類產(chǎn)酸、產(chǎn)氣,是人和動物腸道中的正常棲居菌,嬰兒出生后即隨哺乳進(jìn)入腸道,與人終身相伴,幾乎占糞便干重的1/3.獲得DNA的量很高,但是純度一般,但足夠用于大多數(shù)分子生物學(xué)實驗。

大腸桿菌基因組DNA提取試劑盒CTAB沉淀法是簡便的利用CTAB取大腸桿菌基因組DNA的試劑盒,其提取原理是利用蛋白酶K消化蛋白,CTAB沉淀多糖,再經(jīng)加熱使蛋白變性與DNA分離,乙醇沉淀核酸獲得基因組DNA,可進(jìn)行酶切、PCR等下游實驗。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不用于臨床診斷或治療。

產(chǎn)品組成：

操作步驟：

1. 準(zhǔn)備工作:取TE buffer,加至蛋白酶K中,充分混勻,配制成20mg/ml的白酶K溶液,可分裝成小份,20保存1年有效。

2. 取菌液置于EP管中,離心,棄上清液。再次加入1.5m菌液,重復(fù)該步驟一次。

3. 加入Eco裂解液和3μl白酶K溶液(20mg/ml),充分混勻,37℃孵育1h。

4. 加入CTAB沉淀液,充分混勻,65℃孵育10min

5. 加入780蛋白清除液,充分混勻,12000g離心5~10min

6. 轉(zhuǎn)移上清至新EP管中,加入2倍體積的Eco漂洗液,混勻,20℃放置30min或過夜。

7. 13000g離心10min,棄上清液,加入70%乙醇洗滌沉淀

8. 13000g離心10min,棄上清液,室溫干燥DNA沉淀,加入100或適量 TE buffer溶解沉淀,20℃保存。 TE buffer體積越大,DNA濃度越低。

注意事項：

1. 用于裂解的噬菌體、宿主菌越新鮮，裂解越好，收獲量越大。

2. 為了您的安全和健康，請穿戴一次性手套操作。

有效期：6個月有效。