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總RNA提取試劑盒
產(chǎn)品貨號:26242
產(chǎn)品規(guī)格:50T/100T
產(chǎn)品組成 50T 100T 保存條件
裂解液 50ml 100ml 2-8℃
漂洗液 15ml 15ml×2 室溫
洗柱液 50ml 50ml×2 室溫
RNase free ddH2O 15ml 15ml×2 室溫
RNase free吸附柱 50個(gè) 100個(gè) 室溫
RNase free收集管(2ml) 50個(gè) 100個(gè) 室溫
操作步驟(僅供參考):1. 樣品處理:a. 植物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg組織在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混勻。b. 動(dòng)物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg組織加1ml裂解液,用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。c. 貼壁細(xì)胞:直接在培養(yǎng)板中加入裂解液裂解細(xì)胞,每106細(xì)胞加1ml裂解液。用取樣器吹打混勻。d. 細(xì)胞懸液:離心收集細(xì)胞。每106動(dòng)物、植物和酵母細(xì)胞或每107細(xì)菌細(xì)胞加1ml裂解液混勻。e. 血液處理:取0.2-1ml新鮮血液加3倍體積紅細(xì)胞裂解液,混勻后室溫放置10分鐘,10000rpm離心1分鐘。棄上清,若沉淀含有紅細(xì)胞,可加入2倍體積紅細(xì)胞裂解液重復(fù)裂解步驟。離心后沉淀加入1ml裂解液混勻。2. 將處理后的樣品在室溫放置5分鐘,使得核酸蛋白復(fù)合物*分離。3. 向勻漿樣品中加0.2ml氯仿,蓋好管蓋,劇烈振蕩15秒,室溫放置3-5分鐘。4. 2-8℃ 12000rpm離心10分鐘。RNA主要在上層無色的水相中,把水相轉(zhuǎn)移到新管中,不要吸到沉淀。5. 吸附柱前處理:在吸附柱中加入500ul洗柱液,室溫放置2分鐘,2-8℃ 12,000 rpm離心2min,棄廢液。6. 第4步收集的上清中加入200ul無水乙醇混勻,加入吸附柱靜置2分鐘,2-8℃ 12000rpm離心2min,棄廢液。7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),2-8℃ 12,000 rpm離心2min,棄廢液。8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8℃ 12,000 rpm離心2min,棄廢液。9. 12000rpm離心2min,棄掉收集管,將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘將吸附柱中殘余的漂洗液去除。10. 將吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O,室溫放置5min,12000rpm室溫離心2min即得到RNA。注意事項(xiàng):1. 所有相關(guān)器皿耗材都應(yīng)為RNase-free產(chǎn)品,操作過程要小心,帶口罩、手套避免環(huán)境中RNA酶污染樣品。2. RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之間,但這并不表示RNA不純,需電泳檢測。保存條件: 12個(gè)月有效。
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