植物基因組DNA提取試劑盒(CTAB粗提法)

產(chǎn)品貨號(hào)：11130

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

從植物組織中制備基因組DNA較常采用的方法有氯化離心法、CTAB抽提法等。CTAB抽提法是經(jīng)典迅速的植物DNA提取法，可以用于多種不同類型植物樣品DN A的提取，獲得的量很高，但是純度一般，但是足夠用于大多數(shù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

尚寶生物 植物基因組DNA提取試劑盒(CTAB粗提法)是簡(jiǎn)單快速簡(jiǎn)便的提取植物總DNA的試劑盒，先將新鮮植物樣本研磨破碎細(xì)胞壁，加入CTAB抽提液使細(xì)胞膜破裂同時(shí)將核酸與植物多糖等雜質(zhì)分開。該試劑盒中CTAB抽提液的有效成分為CTAB(十六烷基三乙基溴化銨)，經(jīng)蛋白清除液等去除蛋白，即可獲得植物基因組DNA，可進(jìn)行酶切、PCR等下游實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1. 液氮研缽或勻漿器

2. 離心管、離心機(jī)

3. 恒溫箱或水浴鍋

4. 氯仿異戊醇(24:1)

操作步驟(僅供參考)：

1. 取5ml或適量的CTAB抽提液，按CTAB抽提液：2- M E = 50:1的比例混勻，置于15 ml或其他規(guī)格的離心管中，60℃預(yù)熱。

2. 稱取1.0～1.5g或適量新鮮植物組織或葉片，用預(yù)冷的液氮或干冰冷卻研缽或勻漿器，將新鮮植物組織或葉片粉碎成細(xì)粉末，將冷凍的組織轉(zhuǎn)移至離心管中。

3. 向粉碎后的組織中加入預(yù)熱的CTAB抽提液，充分混勻，65℃溫育30～60min，并不時(shí)混勻。

4. 加入等體積氯仿異戊醇(24:1)，輕輕顛倒混勻，8000g離心8 min，回收上層水相(即上清液，該上清液中含有所需DNA)。

5. 轉(zhuǎn)移上清液至新的離心管中，加入1/2～2/3體積預(yù)冷的DNA沉淀液，輕輕混勻，室溫靜置使核酸沉至管底。如果觀察不到沉淀，可在室溫下靜置數(shù)小時(shí)至過(guò)夜。

6. 2000g離心2min，輕輕棄上清液。

7. 在松散的DNA沉淀物上加入DNA洗滌液(如果使用1.5ml離心管，加入1ml洗滌液，如果15ml離心管，加入8-10ml洗滌液)，室溫靜置20min，4000g離心10min，輕輕棄上清液。

8. 自然干燥DNA，加入10～20μ l TE buffer，-20℃保存。注意：TE buffer體積越大，DNA濃度越低。

注意事項(xiàng)：

1. 如果每次的使用量很小，可以適當(dāng)分裝后再使用。

2. 用于裂解植物組織或葉片越新鮮，裂解越好、收獲量越大。

3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：12個(gè)月有效。