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維生素C檢測試劑盒(銅氧化比色法)
產(chǎn)品貨號:BA1719
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品簡介:
維生素 C(Vitamin C)又稱L-抗壞血酸,是高等靈長類動物與其他少數(shù)生物的必需營養(yǎng)素。在生物體內(nèi),維生素 C 是一種抗氧化劑,為酸性己糖衍生物,是稀醇式己糖酸內(nèi)酯,保護(hù)身體免于自由基的威脅,同時(shí)也是一種輔酶,其廣泛的食物來源為各類新鮮蔬果。 Vc有L-型和D-型兩種異構(gòu)體,只有 L-型的才具有生理功能,還原型和氧化型都有生理活性。
尚寶生物 維生素C檢測試劑盒(銅氧化法)檢測原理是維生素C的分子結(jié)構(gòu)中具有共軛雙鍵,在酸性溶液中 243nm處有最大吸收峰,在中性或堿性條件下最大吸收峰轉(zhuǎn)移至265nm處,利用銅離子消除背景差異,可用分光光度計(jì)直接測定樣品中的維生素C含量。
本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品名稱 | 50T | 保存條件 |
試劑(A): Vitamin C標(biāo)準(zhǔn)(1.2mg/ml) | 1ml | 4℃,避光 |
試劑(B): 組織勻漿液(10×) | 250ml | 室溫 |
試劑(C): Cu 酸性緩沖液 | 100ml | 室溫 |
試劑(D): Vc Assay buffer | 25ml | 室溫 |
自備材料:
1. 蒸餾水
2. 離心管或試管
3. 水浴鍋或恒溫箱
4. 離心機(jī)
5. 比色杯
6. 分光光度計(jì)
操作步驟 (僅供參考) :
1. 稀釋組織勻漿液:按組織勻漿液(10×):蒸餾水=9:1的比例稀釋,獲得1×組織勻漿液,待用。
2. 樣品制備:取待測材料如青菜、水果以及其他組織等,清洗擦干,準(zhǔn)確稱量30g,加入研磨器內(nèi)。加入少量1×組織勻漿液,研磨碎,留取上清,再次用1×組織勻漿液研磨,最后一并倒入50ml離心管,補(bǔ)充1×組織勻漿液至 50ml。充分混勻后,10000g離心5min。取0.5m上清液,即為待測液。液體樣品直接檢測或稀釋后進(jìn)行檢測。
3. 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線:取Vitamin C標(biāo)準(zhǔn)(1.2mg/ml),用蒸餾水稀釋至120μg/ml,4℃保存?zhèn)溆?。取干凈離心管或試管,按下表進(jìn)行操作,分光光度計(jì)檢測265nm處吸光度,以維生素C濃度(μg/ml)為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo)作圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線。
加入物 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
Vitamin C標(biāo)準(zhǔn)(120μg/ml) | 0 | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 | 0.25 |
蒸餾水 | 0.5 | 0.45 | 0.4 | 0.35 | 0.3 | 0.25 |
Cu酸性緩沖液 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
Vc Assay buffer | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
Vitamin C濃度(μg/ml) | 0 | 1.2 | 2.4 | 3.6 | 4.8 | 6.0 |
4. Vitamin C測定:按下表進(jìn)行操作,以蒸餾水為空白對照,檢測265nm處吸光度。
加入物(ml) | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測定管Ⅰ | 測定管Ⅱ |
待測液 | - | 0.5 | 0.5 |
Vitamin C | 0.5 | - | - |
蒸餾水 | - | - | - |
Cu酸性緩沖液 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
- | - | 50℃水浴15min | |
0.5 | 0.5 | 0.5 |
計(jì)算:
樣品中維生素C含量(μg/30g)=(AⅠ-AⅡ )×N×6/K
液體中維生素C含量(μg/待測樣品ml數(shù))=(AⅠ-AⅡ )×N×6/K
式中:AⅠ=測定管Ⅰ的吸光度值
A Ⅱ =測定管Ⅱ的吸光度值
N=待測樣品稀釋倍數(shù)
K=標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率
注意事項(xiàng):
1. 上述低溫試劑避免反復(fù)凍融,以免失效或效率下降。
2. 待測樣本如不能及時(shí)測定,應(yīng)置于2~8℃保存,3天內(nèi)穩(wěn)定。
3. 如果樣品濃度過高,應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
有效期:6個(gè)月有效。
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