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原卟啉(FEP)檢測(cè)試劑盒(熒光比色法)
產(chǎn)品貨號(hào):BA1745
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
原卟啉(Protoporphyrin IX)分子量為562.66,CAS號(hào)為553-12-8,在生物體內(nèi)原卟啉的含量可間接反應(yīng)鐵的缺乏與否。尚寶生物 原卟啉(FEP)檢測(cè)試劑盒(熒光比色法)是利用酸化液破壞紅細(xì)胞并提取原卟啉(FEP),后者在紫外線照射下會(huì)發(fā)出熒光,可通過(guò)熒光分光光度計(jì)等測(cè)定FEP含量。該試劑盒主要用于檢測(cè)人、動(dòng)物血液的紅細(xì)胞內(nèi)游離原卟啉(FEP)的測(cè)定,反映缺鐵性貧血的程度,但應(yīng)事先或者事后檢測(cè)相應(yīng)的紅細(xì)胞比容。該試劑盒僅用
于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品名稱 | 50T | 儲(chǔ)存條件 |
試劑(A): 肝素鈉溶液(125U/ml) | 0.5ml | -20℃ |
試劑(B): 原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)(5mg/L) | 1ml | -20℃,避光 |
試劑(C): FEP酸化液 | 2×100ml | 室溫 |
自備材料:
1. 生理鹽水
2. 漩渦振蕩器、離心機(jī)
3. 熒光分光光度計(jì)
操作步驟:
1. 配制肝素抗凝全血:按新鮮全血:肝素鈉溶液(125U/ml)=9:1配制。
2. 配制原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)工作液(50μg/L): 室溫溶解原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)(5mg/L),取10μl加至990μl的FEP酸化液,混勻,即為原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)工作液(50μg/L)。4℃可保存1周。
3. 按下表進(jìn)行操作,并以生理鹽水作為空白對(duì)照:
空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 待測(cè)管 | |
肝素抗凝全血 | - | - | 0.05 |
原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)工作液(50μg/L) | - | 0.05 | - |
生理鹽水 | 0.05 | - | - |
FEP 酸化液(ml) | 3.5 | 3.5 | 3.5 |
4. 置于漩渦振蕩器上振蕩2~3min,3000g離心6min,取上清。
5. 熒光分光度計(jì)進(jìn)行熒光度測(cè)定(激發(fā)濾片400nm,發(fā)射濾片600nm)。以空白管作為調(diào)零點(diǎn),標(biāo)準(zhǔn)管校熒光強(qiáng)度并調(diào)至 100,讀取待測(cè)管的熒光強(qiáng)度讀數(shù)(Fu)。
6. 另用該肝素抗凝全血測(cè)紅細(xì)胞比容(PCV)。
計(jì)算結(jié)果:FEP(μg/L,RBC)=35/(Fu/PCV)
參考區(qū)間:正常人: (398.4±131.7)ug/L RBC
注意事項(xiàng):
1. 整個(gè)操作均應(yīng)在避光條件下進(jìn)行,并盡快完成。
2. 原卟啉在強(qiáng)光下易分解,收集好的血液樣本應(yīng)立即4℃避光保存,24h以內(nèi)用完。
3. 熒光強(qiáng)度會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸衰退,但2h以內(nèi)基本穩(wěn)定。
4. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
保存條件:6個(gè)月有效。
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