茶多酚（TP）檢測(cè)試劑盒（酒石酸鐵比色法）

產(chǎn)品貨號(hào): BA1569

產(chǎn)品規(guī)格: 50T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

茶多酚(Tea?Polyphenols，TP)是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱，包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等，是一類兒茶素為主體的黃酮化合物，兒茶素占60~80%，具有C6-C3-C6碳骨架結(jié)構(gòu)，是一種重要的天然抗氧化物質(zhì)，能夠清除自由基。類物質(zhì)茶多酚又稱茶鞣或茶單寧。

茶多酚(TP)檢測(cè)試劑盒(酒石酸鐵比色法)檢測(cè)原理是以酒石酸鐵為底物，利用茶多酚與酒石酸鐵反應(yīng)，生成穩(wěn)定化合物，以分光光度計(jì)540nm處測(cè)定吸光度，在一定范圍內(nèi)吸光度與顏色深淺的變化成正比，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，進(jìn)而計(jì)算茶多酚含量。該試劑盒主要用于測(cè)定植物組織、血清等樣品中茶多酚含量，尤其適用于測(cè)定茶葉中茶多酚含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1.        蒸餾水

2.        研缽

3.        離心管或試管

4.        離心機(jī)

5.        比色杯

6.        分光光度計(jì)

操作步驟（僅供參考）：

1.        配制茶多酚標(biāo)準(zhǔn)：取干凈離心管或試管和茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)，按下表進(jìn)行操作，依次稀釋。

2.        準(zhǔn)備樣品：?

①植物樣品：取植物組織，研磨成粉末。煮沸?TP?Assay?buffer，將0.2g粉末*加入TP?Assay?buffer中，沸水浴，用200目細(xì)胞篩或?yàn)V紙過濾。濾渣再繼續(xù)置于新的煮沸4.5ml?TP?Assay?buffer中，沸水浴，用200目細(xì)胞篩或?yàn)V紙過濾，合并兩次濾液。5000g離心，取上清液，即為茶多酚提取液。4℃避光保存，用于茶多酚的檢測(cè)。?

②血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于本試劑盒的測(cè)定，4℃避光保存，用于茶多酚的檢測(cè)。?

③細(xì)胞或組織樣品：取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液，如有必要用TP?Assay?buffer進(jìn)行適當(dāng)勻漿，5000g離心15min，取上清液，即為茶多酚提取液。4℃避光保存，用于茶多酚的檢測(cè)。

④高濃度樣品：如果樣品中含有較濃度的茶多酚，可以使用TP?Assay?buffer進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尅?

3.        TP加樣：按照下表設(shè)置空白管、對(duì)照管、測(cè)定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的TP濃度過高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置2平行管，求平均值。

4.        TP測(cè)定：比色杯光徑1.0cm，以空白調(diào)零，以分光光度計(jì)測(cè)定540nm處標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管的吸光度。

計(jì)算：

以系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn)濃度(1-5號(hào))(20、40、60、80、100μg/ml)為橫坐標(biāo)，以對(duì)應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得回歸方程。以測(cè)定管吸光度代入回歸方程求得提取液中TP含量。

組織樣本TP含量(μg/g)=(C×V_T)/(W×V_S)

液體樣本TP含量(μg/ml)=(C×VT)/V_S

V_S=測(cè)定時(shí)所用提取液的體積(ml)

注意事項(xiàng):

1.        提取茶多酚時(shí)，注意提前煮沸TP?Assay?buffer，以便充分提取。?

2.        如果沒有分光光度計(jì)，也可以使用普通的酶標(biāo)儀測(cè)定。?

3.        每次檢測(cè)指標(biāo)不宜過多，否則操作時(shí)間不一，有可能導(dǎo)致樣本間的差異。

有效期：6個(gè)月有效。