介紹下使用血細(xì)胞分析儀時的細(xì)節(jié)問題
血液分析儀是目前臨床血液一般檢查常用的檢測儀器,以往使用手工操作顯微鏡計數(shù)方法,由于操作過程的隨機(jī)誤差,實驗器材的系統(tǒng)錯誤和檢測方法的固有誤差,使顯微鏡法細(xì)胞計數(shù)的實驗結(jié)果準(zhǔn)確性受到很大影響。
現(xiàn)在的血細(xì)胞分析儀一般能為臨床疾病診斷、鑒別診斷、治療和療效觀察提供十幾項至幾十項檢測參數(shù)。進(jìn)入21世紀(jì)以來,我國的各級醫(yī)院已基本普及了血細(xì)胞分析儀,使血細(xì)胞分析的質(zhì)量有了明顯的提高,同時,過于機(jī)械的工作方式降低了對專業(yè)知識的要求,出現(xiàn)了諸如過分相信儀器結(jié)果等一些問題。現(xiàn)結(jié)合我國血細(xì)胞分析儀使用現(xiàn)狀,概述在儀器使用中應(yīng)注意的幾個問題。
1,標(biāo)本采集及抗凝劑的使用
標(biāo)本采集及抗凝劑的使用是血細(xì)胞分析儀使用前的質(zhì)量控制關(guān)鍵問題,十分重要,但是人們往往不重視。血液標(biāo)本采集與抗凝劑對血細(xì)胞分析結(jié)果的準(zhǔn)確性影響非常大,例如采血不順利或抗凝效果差常導(dǎo)致血小板計數(shù)減少;同時,采血不順利、血標(biāo)本中存在肉眼不易發(fā)現(xiàn)的小凝塊可導(dǎo)致血細(xì)胞分析儀的計數(shù)孔不*或*堵塞。計數(shù)孔不*堵塞,不容易發(fā)現(xiàn),易造成血標(biāo)本檢測結(jié)果的誤差。標(biāo)本采集涉及的問題主要是用手指血還是靜脈血?用真空采血器還是普通注射器?推薦使用靜脈血和真空采血管采集標(biāo)本? 。血細(xì)胞分析最適抗凝劑為EDTA鹽,它對血細(xì)胞形態(tài)和血小板計數(shù)影響很小,國際血液與標(biāo)準(zhǔn)儀委員會(ICSH)1993年文件建議,血細(xì)胞分析用EDTA-K2作抗凝劑,用量為1.5~2.2 mg/mL血液。同時應(yīng)注意EDTA依賴性血小板聚集可導(dǎo)致假性血小板減少,主要見于腫瘤、自身免疫病、肺心病、晚期妊娠、肝病、毒血癥及一些不明原因疾病L2J,遇到上述情況,應(yīng)該使用草酸銨稀釋液等方法計數(shù)血小板。
2,血細(xì)胞分析儀對細(xì)胞分群
它是過篩手段血細(xì)胞分析儀已從單一的電阻抗技術(shù)發(fā)展成多種技術(shù)包括物理、化學(xué)、免疫學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)等結(jié)合的全自動*儀器,對各種血細(xì)胞分析結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠,自動化程度由單一的三壓分群發(fā)展為血細(xì)胞自動分析系統(tǒng),即全血細(xì)胞計數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)、外周血推片和染色等過程的全自動化。但是,至今任何血細(xì)胞分析儀對血細(xì)胞分群只能是過篩手段,在存在幼稚細(xì)胞等情況下,其分析結(jié)果不可靠,必需行人工顯微鏡復(fù)查。目前,國內(nèi)許多醫(yī)院檢驗科對于血細(xì)胞計數(shù)及細(xì)胞直方圖異常時,基本不復(fù)查或很少行人工顯微鏡復(fù)查,導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確,引發(fā)了不少醫(yī)療投訴、糾紛。例如某女性發(fā)熱患者到某市級醫(yī)院看病,血細(xì)胞分析結(jié)果為白細(xì)胞21.5×10 /L,血紅蛋白98 g/L,血細(xì)胞直方圖異常,但檢驗科沒有對其進(jìn)行人工顯微鏡復(fù)查就發(fā)報告,臨床醫(yī)生根據(jù)患者發(fā)熱、月經(jīng)過多等癥狀,診斷為上感及月經(jīng)不調(diào),治療三個月后,未見明顯效果,到上一級醫(yī)院檢查,白細(xì)胞已升至30.2×10 /L,血紅蛋白下降為89 g/L,血細(xì)胞直方圖異常,經(jīng)人工顯微鏡復(fù)查發(fā)現(xiàn)外周血有35%的幼稚細(xì)胞,骨髓穿刺細(xì)胞學(xué)診斷為白血病。由此可見,過于依賴儀器分析結(jié)果,一方面降低了檢驗師們對專業(yè)知識的要求,認(rèn)識細(xì)胞形態(tài)學(xué)的能力下降了,另一方面擔(dān)誤患者的診斷治療。檢驗界已意識到這個問題的不良后果,《中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志》編輯部已專門組織專家召開了“加強(qiáng)形態(tài)學(xué)臨床檢驗專家座談會”,并提出了解決問題的方案。因此,在日常工作中,應(yīng)加強(qiáng)血細(xì)胞分析儀細(xì)胞異常結(jié)果的人工顯微鏡復(fù)查,確保每一份血常規(guī)檢驗報告的質(zhì)量,特別是避免惡性血液疾病的漏檢。
3 ,血細(xì)胞分析結(jié)果的可比性
目前,國內(nèi)大中型醫(yī)院普通存在多臺相同或不同生產(chǎn)廠家的血細(xì)胞分析儀,而型號及試劑不同的檢測系統(tǒng)對同一標(biāo)本相同項目的檢測結(jié)果間的差異,有時會遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于可接受的誤差范圍。張文等對7個不同的血細(xì)胞分析儀測定白細(xì)胞結(jié)果進(jìn)行比對,發(fā)現(xiàn)其檢測的白細(xì)胞精密度符合臨床要求,但臨床可接受性能評價存在不可比性,需要采取整改措施 。
整改措施主要涉及血細(xì)胞分析儀質(zhì)量控制及校正問題,衛(wèi)生部臨床檢驗中心已開始建立和逐漸完善我國血細(xì)胞分析溯源體系,并且準(zhǔn)備在全國范圍內(nèi)推廣應(yīng)用,這將對血細(xì)胞分析的質(zhì)量控制與校準(zhǔn)體系的建立發(fā)揮重要作用。但是,血細(xì)胞 分析的質(zhì)量控制與校準(zhǔn)體系的建立還面臨許多困難,如血細(xì)胞分析的質(zhì)控做準(zhǔn)品有效期短、價格貴、難以按期得到等因素導(dǎo)致其難以常規(guī)開展 。血細(xì)胞分析的校準(zhǔn)品主要有商業(yè)校正品和定值新鮮全血,商業(yè)校正品對其配套的血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)結(jié)果理想,而對非配套儀器的校準(zhǔn)結(jié)果較差。使用新鮮全血對血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果的比對和校準(zhǔn),多數(shù)進(jìn)行的是其可行性研究。研究證明新鮮全血適用于不同型號血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn),特別是不易獲得配套校準(zhǔn)品的儀器,成本較低,適用性強(qiáng)。
為了提高血液分析儀檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,實行全面質(zhì)量控制及校正至關(guān)重要。血標(biāo)本的正確采集、抗凝劑的合理使用是分析前的關(guān)鍵,對異常的細(xì)胞計算結(jié)果、直方圖異常者應(yīng)該加強(qiáng)人工顯微鏡復(fù)查,完善血細(xì)胞分析溯源體系,探討符合909 我國實際的標(biāo)準(zhǔn)化方案確保分析結(jié)果的一致性,建立一些參考檢測系統(tǒng)或?qū)嶒炇?。而選擇合格的新鮮全血對血細(xì)胞分析儀進(jìn)行比對是一種成本較低、適用性強(qiáng)的提高不同血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果可比性的方法。
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