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原代細(xì)胞復(fù)蘇的基本操作

閱讀：966 發(fā)布時(shí)間：2021-9-9

　　原代細(xì)胞復(fù)蘇的操作步驟：

　　(1)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37℃溫水中，并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化。

　　(2)從37℃水浴中取出凍存管，75%酒精消毒后，打開(kāi)蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸液，加到離心管中。PriCells推薦接種培養(yǎng)瓶，37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。

　　(3)離心，1000rpm，5min。PriCells推薦不離心。

　　(4)棄去上清液，加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶，37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。PriCells推薦小牛血清濃度依據(jù)原代細(xì)胞種類(lèi)。

　　(5)次日更換一次1/2培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。

　　原代細(xì)胞復(fù)蘇操作注意事項(xiàng)：

　　(1)將凍存管從液氮容器中取出時(shí)，要做好防護(hù)工作，以免凍傷。

　　(2)取出凍存管后立即放入水浴中，使其盡快融化(在1-2分鐘內(nèi))。

　　(3)復(fù)蘇*好用新配制的培養(yǎng)液。