Jurkat細胞主要用于研究急性T細胞白血病的發(fā)病機制、病理過程等。由于它源自急性T細胞白血病患者，其細胞特性與疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關，為研究人員提供了良好的體外模型，有助于深入了解白血病細胞的增殖、分化異常以及相關基因表達變化等情況。由于該細胞具有T細胞的相關特性，能夠支持HIV的感染和復制，科研人員可以利用它來篩選抗HIV藥物，研究HIV與宿主細胞之間的相互作用，探索HIV感染后免疫系統(tǒng)的變化規(guī)律等。
 

　　Jurkat細胞的培養(yǎng)與操作注意事項：
 

　　-培養(yǎng)條件：需要在特定的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，一般為RPMI -1640培養(yǎng)基，并添加10的胎牛血清(FBS)，以保證細胞的生長和增殖所需的營養(yǎng)物質和生長因子。同時，要維持適宜的溫度(通常為37℃)、二氧化碳濃度(一般為5)和濕度等環(huán)境條件。
 

　　-傳代操作：傳代時需要注意適當?shù)谋壤?，一般按?:3的比例進行傳代，避免細胞密度過高或過低影響細胞的生長狀態(tài)。在操作過程中，要嚴格遵循無菌操作原則，防止細菌、真菌等污染，因為一旦細胞被污染，可能會影響實驗結果的準確性，甚至導致細胞系的特性發(fā)生改變。
 

　　-凍存與復蘇：為了長期保存，可以采用凍存的方法。凍存時需要使用合適的凍存液，一般包含DMSO等成分，以保護細胞在低溫下的存活。復蘇時要注意快速融化，并及時更換新鮮的培養(yǎng)基，讓細胞適應新的生長環(huán)境。
 

　　Jurkat細胞的測定步驟：
 

　　1.細胞培養(yǎng)與準備
 

　　-細胞復蘇：從液氮或-80℃冰箱中取出凍存管，迅速放入37℃水浴鍋中，輕輕搖動使其快速融化。在超凈工作臺中，將融化的細胞懸液轉移到含有預熱培養(yǎng)基的離心管中，離心去除凍存液，然后接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中。
 

　　-細胞計數(shù)：當細胞生長至一定密度時，取適量細胞懸液，用血細胞計數(shù)板或自動化細胞計數(shù)儀進行細胞計數(shù)，以確定細胞濃度。
 

　　2.具體實驗測定
 

　　-流式細胞術胞內染色：計數(shù)，每個樣品取2×10?的細胞于無血清的RPMI培養(yǎng)基，37℃ Rest處理1h。每組實驗分為0min/2min/5min的樣，分別用100μl的PBS重懸，轉移到96孔板。刺激物和細胞置于37℃水浴鍋或者金屬浴5min預熱。加入50μl的3×刺激物，37℃孵育固定時間點后快速加入200μl 4 PFA終止刺激并固定細胞，輕微吹吸避免細胞聚團，37℃處理15min。
 

　　-細胞增殖檢測：例如利用CCK-8實驗檢測增殖水平時，將不同濃度的藥物或刺激物與Jurkat細胞共同培養(yǎng)24h或48h，然后加入CCK-8試劑，繼續(xù)培養(yǎng)一段時間，用酶標儀測定吸光度，以評估細胞增殖情況。