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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1株 |
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貨號 | SNL-192 | 主要用途 | 實驗 |
生長情況 | 貼壁 | 培養(yǎng)條件 | H-DMEM+10%FBS+1%雙抗 |
143B人骨肉瘤細胞|通過STR鑒定高活性
143B人骨肉瘤細胞|通過STR鑒定高活性
一、細胞基本屬性
細胞名稱人骨肉瘤細胞
細胞別稱143B
細胞貨號SNL-192
細胞種屬人
生長情況貼壁
培養(yǎng)條件H-DMEM+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細胞培養(yǎng)操作
換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰M,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰M鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰M消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項不同品牌胰M消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間
消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。
三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手建議);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案