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PriCells: 急速裂解法去除紅細胞

時間:2021-11-1 閱讀:322
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PriCells: 急速裂解法去除紅細胞                                                                            


器材和試劑: 
所有直接接觸細胞的用品和試劑必須無菌。
1. 標注體積刻度的試管(圓錐形底);
2. 巴斯德吸管(短型和長型);
3. 臺式離心機;
4. 培養(yǎng)級純凈水;
5. 2×Hanks平衡鹽溶液;
6. 儲存培養(yǎng)基,含10%血清;


實驗方法:
1. 1000r/min離心原代細胞懸液5min,棄上清;
2. 向細胞沉淀中加入10ml培養(yǎng)級水,并用移液管輕輕來回吹打數次以重懸細胞(注:不同細胞的抗低張能力不同,控制暴露時間低于15s);
3. 迅速加入等體積的2×Hanks平衡鹽溶液恢復張力,用巴斯德吸管輕輕混勻細胞懸液;
4. 再次1000r/min離心5min,檢查紅細胞沉淀。如果紅細胞仍大量存在,重復該步驟。否則在儲存培養(yǎng)基中重懸洗滌過的細胞;
5. 計數及檢測細胞活力后,放培養(yǎng)箱培養(yǎng);


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