武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司

PriCells: 正常大鼠施旺細胞的培養(yǎng)

時間:2021-11-8 閱讀:245
分享:

PriCells: 正常大鼠施旺細胞的培養(yǎng)                                                                              


實驗材料:
1. 生后2d大鼠的坐骨神經;
2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;
3. 消化液:0.25%胰蛋白酶和0.03%膠原酶的混合消化液;
4. 培養(yǎng)液a:DMEM培養(yǎng)液,加入0.02—0.025mol/L HEPES,pH7.2;
5. 培養(yǎng)液b:DMEM,添加10%FBS;
6. 培養(yǎng)器具:眼科剪、眼科鑷、網眼孔徑為60μm的尼龍濾網;


實驗方法:
1. 用70%乙醇消毒動物,斷頭處死,取坐骨神經,放入預冷的培養(yǎng)液a中;
2. 將坐骨神經移入混合消化液中,在37℃水浴中振蕩消化15min;
3. 換新鮮消化液,再次消化15min;
4. 吸去消化液,用培養(yǎng)液b清洗2次,再加入新鮮培養(yǎng)液b,然后用吸管反復吹打。用孔徑為60μm的尼龍濾網,收集濾液,以2000r/min離心10min;
5. 吸去上清液,用培養(yǎng)液b混懸沉淀細胞,將細胞種植于培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,靜置培養(yǎng)24h;
6. 加入10-5mol/L阿糖胞苷,繼續(xù)培養(yǎng)48—72h。當細胞生長形成單層時,進行傳代;


會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話 產品分類
在線留言