脂肪檢測方法可用索式提取法（經(jīng)典方法）

原理

樣品經(jīng)前處理后，放入圓筒濾紙內(nèi)，將濾紙筒置于索式提取管中，利用YM或石油醚在水浴中加熱回流，使樣品中的脂肪進入溶劑中，回收溶劑后所得到的殘留物，即為脂肪（粗脂肪）。

采用這種方法測出游離態(tài)脂，此外還含有磷脂、色素、蠟狀物、揮發(fā)油、糖脂等物質(zhì)，所以用索氏提取法測得的脂肪為粗脂肪。

適用范圍與特點

索氏提取法適用于脂類含量較高，結(jié)合態(tài)的脂類含量較少，能烘干磨細(xì)，不宜吸濕結(jié)塊的樣品的測定。此法只能測定游離態(tài)脂肪，而結(jié)合態(tài)脂肪無法測出，要想測出結(jié)合態(tài)脂肪需在一定條件下水解后變成為游離態(tài)的脂肪方能測出。

另外此法是經(jīng)典方法，對大多數(shù)樣品結(jié)果比較可靠，但需要周期長，溶劑量大。

濾紙筒的制備

將濾紙剪成長方形8×375px ，卷成圓筒，直徑為150px，將圓筒底部封好，最好放一些脫脂棉，避免向外漏樣。

稱取樣品

將樣品烘干磨細(xì)，稱取一定量與紙筒封好上口，最好用測定水的樣品。

索式提取器的準(zhǔn)備

索氏提取器由三部分組成，回流冷凝管、提取管、提脂瓶組成。提脂瓶在使用前需烘干并稱至恒重。其它要干燥。

抽提

將裝好樣的紙筒放入抽提管 ， 倒入YM，YM的量從提取管加入，加入的量為提取瓶體積的2/3 接上冷凝裝置，在恒溫水浴中抽提，水浴溫度大約為55℃左右，可用濾紙檢驗，理論值抽提6-8小時，實際值3-4小時，但也根據(jù)樣品性質(zhì)來決定。

回收YM

當(dāng)YM在提取管內(nèi)即將虹吸時立即取下提取管，將其下口放到Y(jié)M回收瓶內(nèi)，使之傾斜，然后將提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恒重。

計算

脂肪%= (W2-W1)/W x 100

W2——瓶和樣品重（g）

W1——瓶子重量（g）

W——樣品重量（g）

或：脂肪%=（抽提后濾紙與樣品重量—抽提前濾紙重量）/樣品重量 × 100

濾紙筒應(yīng)事先放入燒杯與100-105℃烘箱烘至恒重。

索式提取法注意事項

（1）樣品應(yīng)干燥后研細(xì)，裝樣品的濾紙筒一定要緊密，不能往外漏樣品，否則重做。

（2）放入濾紙筒的高度不能超過回流彎管，否則YM不易穿透樣品，使脂肪不能全部提出，造成誤差。

（3） 碰到含多糖及糊精的樣品要先以冷水處理，等其干燥后連同濾紙一起放入提取器內(nèi)。

（4） 提取時水浴溫度不能過高，一般使YM剛開始沸騰即可（約45℃左右），回流速度以8-12次/時為宜。

（5） 所用YM必需是無水YM，如含有水分則可能將樣品中的糖以及無機物抽出，造成誤差。

（6） 若用干樣品測定脂肪，可按下式計算原來樣品脂肪的含量

脂肪（%）= （W1-W2）(100-A) / W

A— 100克樣品中水分的含量（g）

(7) 冷凝管上端最好連接一個氯化鈣干燥管，這樣不僅可以防止空氣中水分進入，而且還可以避免YM揮發(fā)在空氣中。這樣可防止實驗室微小環(huán)境空氣的污染，如無此裝置，塞一團干脫脂棉球亦可。

（8）如果沒有無水YM可以自己制備，制備方法如下：在100mlYM中，加入無水石膏50克，振搖數(shù)次，靜止10小時以上，蒸餾，收集35℃以下的蒸餾液，即可應(yīng)用。

（9）將提取瓶放在烘箱內(nèi)干燥時，瓶口向一側(cè)傾斜45度防止揮發(fā)物YM易與空氣形成對流，這樣干燥迅速。

（10）如果沒有YM或無水乙醇時，可以用石油醚提取，石油醚沸點30-60℃為好。

（11）使用揮發(fā)YM或石油醚時，切忌直接用火源加熱，應(yīng)用電熱套、電水浴、電燈泡等。

（12） 這里恒重的概念有區(qū)別，它表示最初達到的重量，即溶劑和水分*揮發(fā)時的恒重，此后若在繼續(xù)加熱，則因油脂氧化等原因會導(dǎo)致重量增加。

（13） 在干燥器中的冷卻時間一般要一致。