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實驗常見問題:bEnd.3細胞形態(tài)異常?從接種密度到代謝廢物排查步驟

時間:2025-6-18 閱讀:121
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通過感染表達多瘤病毒中T抗原的NTKmT逆轉(zhuǎn)錄病毒載體來轉(zhuǎn)化細胞。

別稱:bEND.3;b.End3;Bend.3;bEnd3;brain-derived Endothelial cells.3
種屬:小鼠
生長特性:貼壁細胞
細胞形態(tài):上皮細胞樣
凍存條件:凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO
:溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認):生長培養(yǎng)基:DMEM+10% FBS+1% P/S
:培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO?,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例:1:2-1:4
推薦換液頻率:2-3次/周
組織來源:大腦皮層
細胞類型:轉(zhuǎn)化細胞系
生物安全等級:BSL-1
保藏機構(gòu):ATCC; CRL-2299 BCRC; 60515 ECACC; 96091929

注意事項

1.該細胞在低密度下形態(tài)不規(guī)則,細胞數(shù)量少,鋪展面積大,高密度后形態(tài)會趨于一致,胞體密集。

2.細胞增殖偏慢,初次傳代建議1:2,細胞穩(wěn)定后建議傳代比例也不超過1:4。

3.注意觀察培養(yǎng)基顏色,顏色偏紫會導(dǎo)致細胞漂浮增加。

4.消化時間會隨著細胞生長時間和細胞密度而有所不同,需要結(jié)合消化時細胞狀態(tài)來判斷,消化到細胞可以滑落方可終止。

常見問題

Q1:bEnd.3細胞培養(yǎng)的時候有較多漂浮的細胞和碎片是否正常?

細胞生長過程中會有大約10%活細胞單顆漂浮,這部分細胞單獨培養(yǎng)不會貼壁,培養(yǎng)過程中不用特別處理,生長過程中會產(chǎn)生碎片。

Q2:bEnd.3細胞通常消化多久?

細胞培養(yǎng)時間越長越難消化,每次消化時間可能不固定,消化時以細胞鏡下狀態(tài)為準(zhǔn),細胞觸角收縮,細胞間隙明顯變大,輕拍培養(yǎng)瓶細胞可以脫落時可終止消化,注意輕柔吹打細胞。

Q3:bEnd.3細胞形態(tài)有很多觸角是否正常?為什么低密度和高密度細胞形態(tài)不一樣?

這個細胞低密度呈現(xiàn)不規(guī)則細胞形態(tài),細胞鋪展會比較大,高密度呈規(guī)則纖維狀形態(tài)會更規(guī)則。

引用文獻

  • Engineered Extracellular Vesicles Modified by Angiopep-2 Peptide Promote Targeted Repair of Spinal Cord Injury and Brain Inflammation(2025)

    期刊:ACS Nano

    DOI:10.1021/acsnano.4c14675

    影響因子:15.8

    引用產(chǎn)品: C8-D1A 細胞, bEnd.3 [BEND3] 細胞

  • Traditional Chinese Medicine Borneol-Based Polymeric Micelles Intracerebral Drug Delivery System for Precisely Pathogenesis-Adaptive Treatment of Ischemic Stroke(2025)

    期刊:Advanced Science

    DOI:10.1002/advs.202410889

    影響因子:14.3

    引用產(chǎn)品: BV2 細胞, bEnd.3 [BEND3] 細胞, SH-SY5Y [SHSY-5Y] 細胞


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