苯乙醇胺A快速檢測(cè)試劑盒

一．苯乙醇胺A快速檢測(cè)試劑盒原理及用途

苯乙醇胺A快速檢測(cè)試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)尿樣、組織、飼料等樣本中的苯乙醇胺A快，試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測(cè)時(shí)，加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液，樣本中的苯乙醇胺A和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗苯乙醇胺A快速抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含苯乙醇胺A快速含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中苯乙醇胺A快速的殘留量。

二．技術(shù)指標(biāo)

試劑盒靈敏度：0.05ppb(ng/ml)

反應(yīng)模式：25℃，30min～15min

檢測(cè)下限：

尿液……………………………0.05ppb

組 織（處理法一）……………0.2ppb

組 織（處理法二）……………0.05ppb

飼料……………………………0.5ppb

 交叉反應(yīng)率：

克倫特羅………………………100%

馬布特羅………………………<1%

溴布特羅………………………<1%

沙丁胺醇………………………<1%

苯乙醇胺A快速……………………<1%

 樣本回收率：

尿樣……………………………95%±10%

組織、飼料……………………85%±15%

 三.苯乙醇胺A快速檢測(cè)試劑盒組成

酶標(biāo)板……………………………96孔

標(biāo)準(zhǔn)液：各1ml

0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb

高標(biāo)準(zhǔn)液（紅蓋）：100ppb………1ml

酶標(biāo)記物（紅蓋）…………………5.5ml

抗體工作液（藍(lán)蓋）………………5.5ml

底物液A（白蓋）……………………6ml

底物液B（黑蓋）……………………6ml

終止液（黃蓋）………………………6ml

20X濃縮洗滌液（白蓋）……………40ml

10X復(fù)溶液(黃蓋)…………………50ml

說(shuō)明書(shū)………………………………1份

四．需要的器材

儀器：酶標(biāo)儀、打印機(jī)、均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平（感量0.01g）

微量移液器：?jiǎn)蔚?/span>20µl-200µl，100µl-1000µl、多道300µl

五．樣本處理前須知：

實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

配液：

配液1：0.1M HCl 溶液

    取0.86ml濃HCl加去離子水至100ml。

配液2：0.1M NaOH 溶液

    稱取0.4g NaOH加去離子水至100ml。

配液3：乙腈-0.1M HCl 溶液

    V乙腈:V0.1M HCl =84:16。

配液4：復(fù)溶液

    將10×復(fù)溶液用去離子水10倍稀釋，用于樣本的復(fù)溶，復(fù)溶液在4℃環(huán)境可保存一個(gè)月。

六．苯乙醇胺A快速檢測(cè)試劑盒操作流程

    將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會(huì)有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。

編    號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

加樣反應(yīng)：加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中，然后加酶標(biāo)記物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應(yīng)30分鐘。

 洗    滌：小心揭開(kāi)蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。

顯    色：每孔加入底物液A 50µl，再加底物液B 50µl，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘。

終    止：每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻，終止反應(yīng)。

 測(cè)吸光值：用酶標(biāo)儀于450nm處測(cè)定每孔吸光度值（建議用雙波長(zhǎng)450/630nm）。測(cè)定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。

七． 苯乙醇胺A快速檢測(cè)試劑盒結(jié)果分析

 百分吸光率的計(jì)算

    標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液（0ppb）的吸光度值，再乘以100%，即

A—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值

A0—0ppb標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值

 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算

    以標(biāo)準(zhǔn)液百分吸光率為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)液濃度（ppb）的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)液的半對(duì)數(shù)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中待測(cè)物的實(shí)際濃度。

    若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算，更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。（歡迎來(lái)電索?。?/span>

八.注意事項(xiàng)

 室溫低于25℃或試劑及樣本沒(méi)有回到室溫（25℃）會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。

 在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

 混合要均勻，洗板要*，在ELISA分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的一致性。

 在所有孵育過(guò)程中，用蓋板膜封住微孔板，避免光線照射。

不要使用過(guò)了有效期的試劑盒，不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。

顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個(gè)單位（A450nm< 0.5 ）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。

反應(yīng)終止液有腐蝕性，避免接觸皮膚。

九.貯藏及保存期

儲(chǔ)藏條件：試劑盒于2-8℃保存，避免冷凍。

保 質(zhì) 期：該產(chǎn)品有效期為1年，生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝盒

十．特別說(shuō)明

 由于不同指標(biāo)檢測(cè)的樣本是不同的，處理方式也是不盡相同，如需了解更多，更詳細(xì)的技術(shù)參數(shù)可聯(lián)系我司客服專員，歡迎廣大社會(huì)各界朋友前來(lái)咨詢和了解。