目錄:上海安為生物科技有限公司>>細(xì)胞系/細(xì)胞株>>人源細(xì)胞系>> huvec人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系HUVEC
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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HUVEC 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化
HUVEC【huve-c】 | |
l 細(xì)胞鑒定 | 免疫熒光鑒定鑒定已通過 |
l 細(xì)胞來源 | 國家資源庫(上海中科院) |
l 細(xì)胞背景 | 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系HUVEC比較久之前由美國ATCC建系, 后來被廣泛使用,但是近些年發(fā)現(xiàn)細(xì)胞源頭存在交叉污染,目前已經(jīng)被國際下架,美國也發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞存在問題,于是新建一個全新的HUVE-C 但是目前這個細(xì)胞引進到國內(nèi)后種子都狀態(tài)很差,不能使用。因此市場上很難找到可以使用的狀態(tài)好的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVE-C細(xì)胞。本公司也是由于沒有合適的細(xì)胞同時狀態(tài)好也準(zhǔn)確,所以我們做了國內(nèi)原代細(xì)胞永生化建系得到一個全新的準(zhǔn)確細(xì)胞:人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞。提供單個內(nèi)皮細(xì)胞marker免疫熒光鑒定。細(xì)胞叫:人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞,和huve-c是同一個類型的細(xì)胞,都是屬于人的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,只是叫法不同,并且由于是國內(nèi)建系的,因此不能提供STR鑒定,而是提供免疫熒光鑒定。 |
l 細(xì)胞特性
| 1) 來源:人臍帶組織 2) 形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣 貼壁生長 3) 含量:>1x106 細(xì)胞數(shù) 4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 5) 用途:僅供科研使用。 |
l 培養(yǎng)條件: | 1)準(zhǔn)備內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系(推薦:PriMed-awcell-002) 內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基 93% 胎牛血清(FBS) 5% 內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 1% 青霉素/鏈霉素,P/S 1% 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 |
l 注意事項:
| 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系HUVEC對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法: 1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10?S的培養(yǎng)基來終止消化。 3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。 3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。 |
l 運輸形式: | 低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。 常溫(2) T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。 |
l 生物安全 | 1. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。 |
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