目錄:上海安為生物科技有限公司>>細(xì)胞系/細(xì)胞株>>人源細(xì)胞系>> h9c2大鼠心肌細(xì)胞H9C2
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更新時(shí)間:2024-08-21 12:54:14瀏覽次數(shù):2906評(píng)價(jià)
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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大鼠心肌細(xì)胞H9C2
H9C2【H9C2】 | |
l 細(xì)胞鑒定 | 種屬鑒定已通過 |
l 細(xì)胞來源 | 國家資源庫 |
l 細(xì)胞背景 | B. Kimes and B. Brandt從源于BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細(xì)胞株亞克隆了H9c2(2-1)細(xì)胞株,它表現(xiàn)許多骨骼肌的特性。這個(gè)細(xì)胞株中的成肌細(xì)胞能融合形成多核的肌管,并對(duì)乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應(yīng)。如果培養(yǎng)基中的血清濃度下降到1%,融合發(fā)生得很快。 |
l 細(xì)胞特性
| 1) 來源:心臟 2) 形態(tài):成肌細(xì)胞,貼壁生長(zhǎng) 3) 含量:>1x106 細(xì)胞數(shù) 4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 5) 用途:僅供科研使用。 |
l 培養(yǎng)條件: | 1) 準(zhǔn)備DMEM (含1.5g/L NaHCO3推薦:awcell-128-0001)或(GIBCO,貨號(hào)12800017,添加NaHCO3 1.5g/L)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗1%。 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 |
l 注意事項(xiàng):
| 注意: 大鼠心肌細(xì)胞H9C2該細(xì)胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好,大部分品牌的DMEM含有較高濃度的NaHCO3(3.7g/L),若使用DMEM(3.7g/L NaHCO3)培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提高CO2濃度(7%-10%)。 對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法: 1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10?S的培養(yǎng)基來終止消化。 3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。 3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。 |
l 運(yùn)輸形式: | 低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。 常溫(2) T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。 |
l 生物安全: | 1. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會(huì)泄漏,并會(huì)慢慢充滿液氮。解凍時(shí),液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。 |
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