l 細胞鑒定

STR鑒定已通過

l 細胞來源

國家資源庫

l 細胞背景

人白血病T淋巴細胞，Jurkat細胞由Schneider建立，來源于一個14歲的男孩的外周血。最初命名為 JM。該細胞系是從 Kendall Smith 博士從 Jurkat-FHCRC細胞株中獲得一個克隆，不含支原體。經(jīng)佛波酯(phorbol esters)和外源凝集素（lectins）或抗T3單克隆抗體（需要兩種物質共同誘導）誘導后可產生大量IL-2。

l 細胞特性

1） 來源：T淋巴細胞；急性T細胞白血病

2） 形態(tài)：淋巴母細胞,懸浮生長

3） 含量：>1x106 細胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用

l 培養(yǎng)條件：

1）準備  1640基礎培養(yǎng)基           （awcell-0002）                87%

    優(yōu)質胎牛血清                   （awcell-0500）               10%

    GlutaMAX-1谷氨酰胺             ( awcell-0900 )                 1%

    Sodium Pyruvate丙酮酸鈉         ( awcell-01100 )                1%

P/S青霉素-鏈霉素              （awcell-15140-122）             1%

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

l 注意事項：

參考傳代周期：

不超過300萬細胞/ mL，建議將活細胞密度控制在10萬-100萬/ mL之間參考傳代密度：10萬活細胞/ mL,參考換液頻率：2-3天。

注意：

a）該細胞為懸浮細胞，根據(jù)培養(yǎng)經(jīng)驗以及客戶的反饋，傳代時使用【半換液法】對細胞狀態(tài)有利，因此我?guī)旖ㄗh您使用【半換液法】進行傳代。同時，您在收到細胞后，請不要通過離心的方式收集細胞，可以直接向培養(yǎng)瓶中添加等體積的新鮮培養(yǎng)液，然后將細胞吹打均勻后移入兩個新的T25培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)即可。

b）該細胞對血清質量較為敏感，建議您使用進口優(yōu)質血清進行培養(yǎng)，傳代時請注意保持細胞密度在合適的范圍。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

懸浮狀態(tài)下生長的細胞，可以通過向培養(yǎng)瓶中添加*培養(yǎng)基來維持細胞的生長狀態(tài)，一般情況下細胞密度維持在1×105~1×106個/mL（不同細胞對密度要求不同，）可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3） 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

l 運輸形式：

低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

常溫（2） T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

l 生物安全

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。