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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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大鼠肝癌細胞 h4-II-E-C3
H4-II-E-C3【H4】 | |
l 細胞鑒定 | 種屬鑒定已通過 |
l 細胞來源 | 國家資源庫 |
l 細胞背景 | 在糖皮質(zhì)激素、胰島素或cAMP衍生物的誘導(dǎo)下可以產(chǎn)生酪氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶;可被逆轉(zhuǎn)錄病毒感染;可產(chǎn)生白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、凝血酶原;在AxC大鼠中可以成瘤。 |
l 細胞特性
| 1) 來源:大鼠 肝 2) 含量:>1x106 細胞數(shù) 3) 形態(tài):上皮樣,貼壁細胞 4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 5)用途:僅供科研使用。 |
l 培養(yǎng)條件: | 1) 準備DMEM(推薦awcell-0001)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,5%;20%HS(馬血清),雙抗,1%。 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 |
l 注意事項:
| 大鼠肝癌細胞 h4-II-E-C3對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法: 1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10?S的培養(yǎng)基來終止消化。 3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。 3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。 |
l 運輸形式: | 低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。 常溫(2) T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。 |
l 生物安全: | 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。 |