目錄:上海安為生物科技有限公司>>細胞系/細胞株>>人源細胞系>> MDA MB 436人乳腺癌細胞 MDA-MB-436
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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MDA-MB-436 人乳腺癌細胞
MDA-MB-436【MDA MB 436】 | |
l 細胞鑒定 | STR鑒定已通過 |
l 細胞來源 | 國家資源庫 |
l 細胞特性
| 1) 來源:人,女性,乳腺腺癌胸水轉(zhuǎn)移灶 2) 形態(tài):有多核成分的多形細胞,貼壁生長 3) 含量:>1x106 細胞數(shù) 4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 5) 用途:僅供科研使用。 |
l 培養(yǎng)條件: | 1) 準備L15 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (awcell-0009) 89% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清 (awcell-0500) 10% P/S青霉素-鏈霉素 (awcell-15140-122) 1% 谷胱甘肽(還原型) (awcell-8180) 16ug/ml 胰島素 (awcell-0016-a) 0.01mg/ml 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,100%; 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 |
l 注意事項:
| 注意事項: a. 該細胞不能用胰酶消化,傳代時,使用細胞刮鏟輕輕把細胞刮下來。抽出細胞液離心后傳到新的培養(yǎng)瓶中。 b. L-15培養(yǎng)基配方設(shè)計用于與大氣進行自由氣體交換。使用該培養(yǎng)基進行培養(yǎng)時應(yīng)使用空氣100%。CO 2和空氣混合物對細胞有害。如果沒有條件準備空氣氣相100%的培養(yǎng)箱的,可以采用不透氣密封蓋的T25培養(yǎng)瓶來培養(yǎng),培養(yǎng)過程中每天將細胞拿出培養(yǎng)箱換1-2次空氣。 1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。 3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。 4)運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。 |
l 運輸形式: | 低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。 常溫(2) T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。 |
l 生物安全 | 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。 |