l 細胞鑒定

STR鑒定已通過

l 細胞來源

國家資源庫

l 細胞特性

1） 來源：人、女性、外周血

2） 形態(tài)：成淋巴瘤細胞，懸浮和輕微的貼壁同時存在

3） 含量：>1x106  細胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5） 用途：僅供科研使用。

l 培養(yǎng)條件：

1）準備1640（推薦：awcell-0002）培養(yǎng)基,優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %，P/S青霉素-鏈霉素 1%

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

l 注意事項：

 注意事項：

a.該細胞同時存在懸浮生長和輕微的貼壁狀態(tài)。

b.該細胞復(fù)蘇后需培養(yǎng)2周左右時間，才能恢復(fù)正常生長狀態(tài)。

c.細胞密度不可過高，在細胞匯合前進行傳代，過度融合生長細胞容易產(chǎn)生死細胞團。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞，傳代可以參考以下方法：

該細胞是一種混合生長的細胞；細胞既可以以輕度附著的單層形式生長，也可以以懸浮液形式生長。可以通過添加新鮮培養(yǎng)基來維持培養(yǎng)?；蛘?，可以通過將貼壁細胞用細胞刮鏟刮入含有漂浮細胞的培養(yǎng)基中，通過離心收集細胞，將細胞沉淀重懸于新鮮培養(yǎng)基中并分配到新的培養(yǎng)瓶中來對細胞進行傳代。建議收貨后的第一次傳代密度為1:2進行。后續(xù)的傳代可根據(jù)實際情況按1:2~1:4的比例進行。

3） 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

l 運輸形式：

低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

常溫（2） T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

l 生物安全

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。