目錄:上海安為生物科技有限公司>>細胞系/細胞株>>人源細胞系>> 人臍靜脈內(nèi)皮細胞系HUVEC
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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HUVEC 人臍靜脈內(nèi)皮細胞永生化
HUVEC【huve-c】 | |
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l 細胞鑒定 | 免疫熒光鑒定鑒定已通過 |
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l 細胞來源 | 國家資源庫（上海中科院） |
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l 細胞背景 | 人臍靜脈內(nèi)皮細胞系HUVEC比較久之前由美國ATCC建系， 后來被廣泛使用，但是近些年發(fā)現(xiàn)細胞源頭存在交叉污染，目前已經(jīng)被國際下架，美國也發(fā)現(xiàn)了細胞存在問題，于是新建一個全新的HUVE-C 但是目前這個細胞引進到國內(nèi)后種子都狀態(tài)很差，不能使用。因此市場上很難找到可以使用的狀態(tài)好的人臍靜脈內(nèi)皮細胞HUVE-C細胞。本公司也是由于沒有合適的細胞同時狀態(tài)好也準確，所以我們做了國內(nèi)原代細胞永生化建系得到一個全新的準確細胞：人臍靜脈內(nèi)皮細胞永生化細胞。提供單個內(nèi)皮細胞marker免疫熒光鑒定。細胞叫：人臍靜脈內(nèi)皮細胞永生化細胞，和huve-c是同一個類型的細胞，都是屬于人的臍靜脈內(nèi)皮細胞，只是叫法不同，并且由于是國內(nèi)建系的，因此不能提供STR鑒定，而是提供免疫熒光鑒定。 |
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l 細胞特性
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1） 來源：人臍帶組織
2） 形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣 貼壁生長
3） 含量：>1x106 細胞數(shù)
4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途：僅供科研使用。 |
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l 培養(yǎng)條件： | 1）準備內(nèi)皮細胞培養(yǎng)體系（推薦：PriMed-awcell-002）
內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基 93%
胎牛血清（FBS） 5%
內(nèi)皮細胞培養(yǎng)添加劑 1%
青霉素/鏈霉素，P/S 1% 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 |
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l 注意事項：
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人臍靜脈內(nèi)皮細胞系HUVEC對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10?S的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。 |
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l 運輸形式： |
低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
常溫（2） T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。 |
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l 生物安全 | 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。 |
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