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生化轉(zhuǎn)染的另一種選擇，磷酸鈣介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染

時間：2021/10/11閱讀：1592
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磷酸鈣介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法應(yīng)用于將外源DNA轉(zhuǎn)入培養(yǎng)的細(xì)胞，已有45年以上的歷史。Graham和van der Eb在磷酸鈣存在下，將病毒DNA導(dǎo)入哺乳動物細(xì)胞的這一工作，為基因在多種哺乳動物細(xì)胞中進(jìn)行瞬時表達(dá)奠定基礎(chǔ)。


因此，即使脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法是我們首先選擇，依然有很多實驗員在使用磷酸鈣介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染。


他的主要原理是，磷酸鈣與DNA形成不可溶的沉淀物，即磷酸鈣-DNA復(fù)合物，吸附于細(xì)胞膜表面，通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用或吞噬作用，進(jìn)入細(xì)胞中。磷酸鈣起到促進(jìn)DNA進(jìn)入的細(xì)胞的作用。


磷酸鈣介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法的優(yōu)點：

1、細(xì)胞毒性低

2、可轉(zhuǎn)染大質(zhì)粒

3、操作簡單

4、成本非常低廉。


但具有以下缺點：

1、由于試劑的PH值對沉淀形成有巨大影響，對于不同核酸需要調(diào)整方案

2、有時會表現(xiàn)出免疫原性

3、對原代細(xì)胞無效

4、不能在細(xì)胞培養(yǎng)基中制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物。


在使用上有很多需要注意的地方，這可能也是在生化方法中，脂質(zhì)的優(yōu)先級別更高的理由


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