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生化轉染的另一種選擇，磷酸鈣介導的轉染

時間：2021/10/11閱讀：1715
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磷酸鈣介導的轉染方法應用于將外源DNA轉入培養(yǎng)的細胞，已有45年以上的歷史。Graham和van der Eb在磷酸鈣存在下，將病毒DNA導入哺乳動物細胞的這一工作，為基因在多種哺乳動物細胞中進行瞬時表達奠定基礎。


因此，即使脂質(zhì)體介導的轉染方法是我們首先選擇，依然有很多實驗員在使用磷酸鈣介導的轉染。


他的主要原理是，磷酸鈣與DNA形成不可溶的沉淀物，即磷酸鈣-DNA復合物，吸附于細胞膜表面，通過細胞的內(nèi)吞作用或吞噬作用，進入細胞中。磷酸鈣起到促進DNA進入的細胞的作用。


磷酸鈣介導的轉染方法的優(yōu)點：

1、細胞毒性低

2、可轉染大質(zhì)粒

3、操作簡單

4、成本非常低廉。


但具有以下缺點：

1、由于試劑的PH值對沉淀形成有巨大影響，對于不同核酸需要調(diào)整方案

2、有時會表現(xiàn)出免疫原性

3、對原代細胞無效

4、不能在細胞培養(yǎng)基中制備轉染復合物。


在使用上有很多需要注意的地方，這可能也是在生化方法中，脂質(zhì)的優(yōu)先級別更高的理由


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