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中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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qPCR中的相對(duì)定量是什么？

時(shí)間：2021/10/14閱讀：2679
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相對(duì)定量常用于測(cè)定兩個(gè)不同樣品中靶基因量的差異，例如使用實(shí)時(shí)RT-PCR法定量檢測(cè)mRNA水平的實(shí)驗(yàn)。


進(jìn)行相對(duì)定量實(shí)驗(yàn)分析兩個(gè)不同樣品的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)時(shí)，需要對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化處理，設(shè)置其中一個(gè)樣品的靶基因表達(dá)量為“1"。這個(gè)樣品稱(chēng)為校準(zhǔn)品，常使用表達(dá)恒定的內(nèi)參基因。


通常，校準(zhǔn)品歸一化后，待測(cè)樣品靶基因表達(dá)量以比“1"增加或降低n倍來(lái)表示，來(lái)顯示表達(dá)量的差異。

qPCR中的相對(duì)定量是什么？

值得注意的是，實(shí)驗(yàn)必須從等量原料中取得校準(zhǔn)品和待測(cè)樣品的靶基因，否則比較無(wú)意義。


與絕對(duì)定量相比，相對(duì)定量實(shí)驗(yàn)優(yōu)點(diǎn)在于內(nèi)參基因的使用，能規(guī)避實(shí)驗(yàn)操作產(chǎn)生的差異，而且不需要制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。


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