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中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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為什么細(xì)胞會(huì)抱團(tuán)?因?yàn)樘鞖饫淞耍?/h1>
時(shí)間:2021/12/9閱讀:4053
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是否總是遇到細(xì)胞抱團(tuán)的現(xiàn)象?是否總是因?yàn)楦悴磺宄?xì)胞抱團(tuán)原因而困惑?是否總是因?yàn)殡y以將抱團(tuán)細(xì)胞拯救回來(lái)而抓狂?童鞋們,我來(lái)拯救你們的細(xì)胞了,今天給大家從四個(gè)層面剖析細(xì)胞抱團(tuán)的真實(shí)原因,快來(lái)圍觀吧!


一、細(xì)胞本身生長(zhǎng)特性有抱團(tuán)傾向

有些細(xì)胞本身有抱團(tuán)生長(zhǎng)的特性,給大家看五種喜歡抱團(tuán)的細(xì)胞類(lèi)型:


細(xì)胞類(lèi)型①:NCI-H716 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)


圖片
細(xì)胞喜歡在懸浮液中呈葡萄狀聚集,抱團(tuán)細(xì)胞粒粒飽滿(mǎn)


細(xì)胞類(lèi)型②:Caco-2人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

形態(tài):上皮樣

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)


圖片
此細(xì)胞喜歡貼壁成片分布,呈融合狀,細(xì)胞個(gè)頭大小不勻


細(xì)胞類(lèi)型③:CaLu-3 人肺癌細(xì)胞

形態(tài):上皮樣

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)


圖片
此細(xì)胞也是喜歡聚集分布,呈片狀,片狀之間有空白



細(xì)胞類(lèi)型④:SH-SY5Y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

形態(tài):上皮樣

生長(zhǎng)特性:貼壁和懸浮生長(zhǎng)


圖片
此細(xì)胞貼壁居多,有輕微的抱團(tuán)傾向



細(xì)胞類(lèi)型⑤:BT-474人乳腺癌細(xì)胞

形態(tài):上皮樣

生長(zhǎng)特性:貼壁、片狀生長(zhǎng)


圖片
此細(xì)胞也是喜歡片狀生長(zhǎng)



除了有喜歡抱團(tuán)的細(xì)胞類(lèi)型,也會(huì)有喜歡分散生長(zhǎng)的細(xì)胞類(lèi)型,來(lái)給大家展示二種細(xì)胞類(lèi)型:

細(xì)胞類(lèi)型①:MSC(人源脂肪來(lái)源)

形態(tài):成纖維樣

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)


圖片
此細(xì)胞成纖維樣,均勻分布,平鋪皿底,不留空隙



細(xì)胞類(lèi)型②:HEF小兒包皮成纖維細(xì)胞(人源脂肪來(lái)源)

形態(tài):成纖維樣

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)


圖片
此細(xì)胞也是喜歡分散生長(zhǎng),均勻分布



大多數(shù)上皮樣或神經(jīng)母細(xì)胞瘤樣的細(xì)胞更喜歡抱團(tuán)生長(zhǎng),而大多數(shù)成纖維樣細(xì)胞更喜歡分散、均勻生長(zhǎng)。


又有一個(gè)問(wèn)題來(lái)了,那就是我們?nèi)绾螀^(qū)分細(xì)胞抱團(tuán)正不正常。

這里開(kāi)始劃重點(diǎn)了,大家看好了:

  1. 如果細(xì)胞本身是分散生長(zhǎng),結(jié)果抱團(tuán)嚴(yán)重,說(shuō)明細(xì)胞“生病"了,我們要給細(xì)胞“診治"。

  2. 如果本身生長(zhǎng)特性就有抱團(tuán)的細(xì)胞,如何判斷它的抱團(tuán)正不正常呢?


這里小編告訴您,細(xì)胞哪怕是抱團(tuán)了,也是“粒粒飽滿(mǎn),棱角分明"的,回頭看看上面抱團(tuán)的細(xì)胞,是不是細(xì)胞之間有明確的“分界線",這說(shuō)明它們抱在一起很健康;而異常的細(xì)胞抱團(tuán),你是觀察不到細(xì)胞之間的“界限"的,細(xì)胞形態(tài)也不規(guī)則,邊緣模糊,遠(yuǎn)遠(yuǎn)看去,抱團(tuán)的細(xì)胞像“一團(tuán)漿糊"。



二、細(xì)胞老化更容易抱團(tuán) 


細(xì)胞類(lèi)型:MSC(人源臍帶來(lái)源第6代)

形態(tài):成纖維樣

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

圖片
如圖所示:

人臍帶來(lái)源第6代的間充質(zhì)干細(xì)胞,白色箭頭指示的是發(fā)生細(xì)胞老化的MSC細(xì)胞,β-半乳糖苷酶染色陽(yáng)性,染上藍(lán)色。由圖片可以看出老化細(xì)胞體積增大、細(xì)胞扁平。白圈圈起來(lái)的是聚團(tuán)細(xì)胞,老化細(xì)胞容易聚團(tuán)生長(zhǎng),狀態(tài)變差。


三、血清批間差可能導(dǎo)致細(xì)胞抱團(tuán) 

那么問(wèn)題來(lái)了,血清為何有批間差?

因?yàn)檠鍋?lái)源于動(dòng)物,其組成成分有1000種左右,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏哪挲g、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件而異。每個(gè)批號(hào)的組分百分比含量都是不固定的,所以批間差異是存在的。

圖片

H9c2 低密度正常形態(tài)

舊批次血清


圖片

H9c2 低密度抱團(tuán)形態(tài)

新批次血清


圖片

H9c2高密度異常形態(tài)

舊批次血清


圖片

H9c2高密度異常形態(tài)

新批次血清


血清批間差可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞抱團(tuán)。

如圖所示,大鼠心肌細(xì)胞在更換了新批次的血清之后,隨著傳代次數(shù)的增加,抱團(tuán)明顯。正常低密度下,細(xì)胞舒展開(kāi)來(lái),均勻分散,但異常的的細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)聚集生長(zhǎng)狀態(tài),高密度下正常細(xì)胞像鋪路石一樣均勻鋪滿(mǎn),不留空隙,但高密度下異常的細(xì)胞,形態(tài)模糊,難以辨認(rèn),像四川九寨溝一樣的溝壑重生。


四、胰酶消化不當(dāng)容易導(dǎo)致細(xì)胞抱團(tuán) 

圖片

HEK293細(xì)胞


導(dǎo)致細(xì)胞抱團(tuán)的第一種情況是胰酶消化操作不當(dāng)。

如果您經(jīng)常遇到傳代的細(xì)胞貼壁后老是貼壁不勻,成片分布,抱團(tuán)生長(zhǎng),來(lái)看看你有沒(méi)有注意這幾個(gè)細(xì)節(jié)噢。

1、如圖所示,HEK 293因消化過(guò)度或吹打過(guò)猛導(dǎo)致細(xì)胞受傷嚴(yán)重,破損的細(xì)胞碎片容易粘連抱團(tuán);

2、消化時(shí)細(xì)胞融合率太高,成片脫落,將不容易被吹散,容易抱團(tuán),我們建議細(xì)胞融合率達(dá)到80%傳代為佳;

3、吹打力度不足,難以將成片脫落的細(xì)胞吹散,容易抱團(tuán)。



以上就是本期的內(nèi)容,更多資訊,歡迎關(guān)注安培生物科技有限公司了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


安培生物科技有限公司介紹:

安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶(hù),提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專(zhuān)注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。


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