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小鼠皮脂腺的油紅染色實驗步驟

時間：2021/12/12閱讀：2393
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材料與儀器


器材：棕色可密封瓶、研缽、漏斗、定性濾紙、冷凍切片等
試劑：

① 油紅染料（稱取預先研磨粉碎的 0.5 g 油紅干粉，溶于少量異丙醇中，然后加異丙醇至 100 ml，棕色瓶密封（或錫箔紙包裹避光）4 ℃ 保存，為儲存液，可長期保存。用時油紅工作液需現配：取 6 ml 加三蒸水 4 ml 混勻，定性濾紙過濾，稀釋后數小時內用完）


② 異丙醇


步驟


小鼠皮脂腺的油紅染色實驗的基本過程可分為如下幾步：

1. 將冷凍切片從冰箱中取出，晾干。

2. 用 PBS 洗 3 次，每次 5 分鐘。

3. 用 4％ 多聚甲醛固定 5～10 分鐘。

4. 用蒸餾水洗兩遍，每次 5 分鐘。

5. 將切片放入 60％ 異丙醇洗兩遍，每次 5 分鐘。

6. 將切片放入油紅工作液染色 15 分鐘。

7. 用 60％ 異丙醇洗兩遍，每次 5 分鐘。

8. 用蒸餾水洗兩遍，每次 5 分鐘。

9. 蘇木素復染 2 分鐘。

10. 水充分漂洗 10 分鐘，把周圍水分抹干。

11. 封片劑封片，鏡檢。結果示例如圖 8-11-2 所示。


注意事項


1. 由于脂肪易溶于有機溶劑，所以顯示脂肪一般不能像石蠟切片一樣處理，而通過冷凍切片染色來顯示。
2. 做脂肪染色的冷凍切片不能太薄，過薄的切片常會使脂質丟失。
3. 蘇木素復染時間不能過長。
4. 染色結果不能長期保存，應盡快觀察及照相。


以上就是本期的內容，更多資訊，歡迎關注安培生物科技有限公司了解更多技術與產品資訊。


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