BV2細(xì)胞異常生長形態(tài)解析及解決方案

從表型上看，BV2細(xì)胞對MAC1和MAC2抗原呈陽性，而對MAC3、膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）和半乳糖核苷（GC）抗原呈陰性[1]。

圖A. BV2細(xì)胞顯微照片，bar=30 μm.

圖B. 通過掃描電鏡觀察，在玻璃蓋板上培養(yǎng)的BV2細(xì)胞，bar=5 μm.

圖C. 通過透射電鏡觀察，BV2細(xì)胞的部分細(xì)胞質(zhì)吞噬iCA，bar=3 μm.

（圖片引用自文獻(xiàn)^[1]）

在培養(yǎng)BV2細(xì)胞的時候，同學(xué)們最常遇到的問題就是生長形態(tài)異常。生長形態(tài)異常往往伴隨著細(xì)胞生長緩慢、細(xì)胞死亡等，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)做不出結(jié)果，給大家?guī)碇刂乩_。

小普根據(jù)多年的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，為大家整理了這一現(xiàn)象可能發(fā)生的原因，及相應(yīng)解決方案。

懸浮細(xì)胞為圓形，貼壁細(xì)胞既有圓形也有梭形。由于圓形細(xì)胞折光率高，它的邊緣看起來是發(fā)亮的；梭形細(xì)胞則向兩端伸出黑色突起。

（圖片源自Procell）

那么，異常生長的BV2細(xì)胞有哪些形態(tài)呢？

如何根據(jù)不同的異常生長形態(tài)，調(diào)整改善培養(yǎng)條件，及時解決問題？

小普總結(jié)如下：

（1）培養(yǎng)基偏堿。培養(yǎng)瓶不透氣或者開封時間過長，培養(yǎng)基PH將增大，可見培養(yǎng)基呈紫紅色。BV2對培養(yǎng)基酸堿度較為敏感，在偏堿培養(yǎng)基中培養(yǎng)數(shù)小時后將會全部飄起。

（2）復(fù)蘇后不貼壁。需要檢查凍存或復(fù)蘇操作過程，以及培養(yǎng)基是否存在問題。

實(shí)驗(yàn)中常用細(xì)菌脂多糖（LPS）和干擾素-γ（IFNγ），分別模擬細(xì)菌和病毒感染，來刺激小膠質(zhì)細(xì)胞激活。受到刺激的小膠質(zhì)細(xì)胞突起縮短變厚，胞體增大，呈現(xiàn)阿米巴樣（如下圖所示）。

但有的時候BV2形態(tài)變化并不明顯，還需要結(jié)合其他實(shí)驗(yàn)，如檢測NO、IL-13等炎癥因子的表達(dá)，來確定BV2是否被定向激活。

（圖片引用自文獻(xiàn)^[2]）

如果細(xì)胞沒有受到任何刺激，就已經(jīng)呈現(xiàn)阿米巴樣，或者受刺激后，炎癥因子表達(dá)沒有差異，那么細(xì)胞有可能發(fā)生了自分化。

其原因可以從以下幾點(diǎn)考慮：

（2）使用的胎牛血清內(nèi)毒素高，內(nèi)毒素刺激細(xì)胞自分化。

總而言之，BV2細(xì)胞的形態(tài)、生長狀態(tài)與其生長環(huán)境息息相關(guān)，給細(xì)胞以最合適的環(huán)境，嚴(yán)格按照要求規(guī)范操作，細(xì)胞也將用好的狀態(tài)回報(bào)你。