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標簽酶消化釋放標簽實驗

時間：2022/3/24閱讀：1093
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材料與儀器

溶液與緩沖液 LoTE
Eppendorf 試管

步驟


實驗方案 A

1.向含有 Dynabeads 的每個試管中加入下列物質(zhì)：

2.65℃ 下酶解 Ih(每 IOmin 混合 1 次)。

3.時收集上清液（含有釋放的 cDNA 標簽）

4.用 LoTE 擴容到 200mL。

5.等體積的 PCI 抽提，乙醇沉淀（實驗方案 A，第 2 步）。

6.將沖洗和風干后的沉淀重新懸浮于 10 ul LoTE 中。

實驗方案 B

1.從 PCR 試管中移去連接反應(yīng)混合物并用 50ul 洗液洗滌 1 次。

2.從試管中移去沖洗液，加入 50 ul 的 1X 限制性緩沖液，然后移去限制性緩沖液。

3.向試管中加入下列物質(zhì)：

4.在 65°C 下消化 lh。

5.加入 175ul 的 LoTE 然后轉(zhuǎn)移到 1.5 ml 的 Eppendorf 試管中。不要丟棄，因為混合物中含有所釋放的附著于接頭上的 SAGE 標簽。

6.如上所述，用等體積的 PCI 抽提，乙醇沉淀（實驗方案 A，第 2 步)。

7.將沖洗和風干后的沉淀重新懸浮于 21.5ul 的 LoTE 中。

以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


安培生物科技有限公司介紹：

安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。



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