深圳市安培生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第5年

19126518388

血清系列
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
支原體清除
細(xì)胞凍存
實(shí)驗(yàn)耗材
分子試劑
細(xì)胞增殖與凋亡
Biozellen系列
培養(yǎng)基
ELISA試劑盒
TOYOBO(東洋紡)
ZYMO RESEARCH
Greiner(格瑞納)
IKA(艾卡)
化學(xué)發(fā)光底物(ECL)
PROSPEC系列
Epigentek系列
微生物檢測(cè)
細(xì)胞生物學(xué)
Corning康寧
解離試劑
細(xì)胞類-實(shí)驗(yàn)耗材
原代細(xì)胞
植物檢測(cè)系列試劑盒
SERANA
BSA
細(xì)胞系
生化試劑盒
環(huán)境檢測(cè)系列試劑盒(AKEN)
類器官培養(yǎng)
緩沖器和解決方案
生物三凝膠基質(zhì)
細(xì)胞因子分子
生物樣本庫(kù)

兔多克隆抗血清的制備

時(shí)間:2023/4/12閱讀:1153
分享:

材料與儀器

抗原
PBS 乙醇
注射針頭 注射器 培養(yǎng)箱

步驟

1. 取2 ml 的弗氏完-全佐劑加到2 ml 的溶于PBS的純化抗原中,使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液,接上22G注射針頭,排出注射器中的氣泡。
2. 將兔子敢在固定架上,用一只手抓住兔的頸背部毛皮,另一只手托住兔的后腿及臀部,將兔束緊固定以使后肢不能伸張,用70%乙醇對(duì)所要注射的區(qū)域進(jìn)行清潔消毒,在后肢大腿肌肉內(nèi)進(jìn)針約1 cm 深,毎條大腿肌肉內(nèi)最多注射0.5 ml 乳化液。
3. 四周后,用1 mg 的混溶干弗氏不完-全佐劑的抗原乳化液(1:1)對(duì)兔進(jìn)行肌肉內(nèi)加強(qiáng)免疫注射,操作步驟同1和2,初次加強(qiáng)免疫后2周再次進(jìn)行加強(qiáng)免疫注射。

4. 第二次加強(qiáng)免疫注射10天后,從兔的耳緣靜脈處放血。

(1)先將兔固定在固定架上(固定緊),使其耳朵伸出,用70%乙醇洗潔消毒一側(cè)耳朵。

(2)將兔耳置于熱燈之下,用手指輕輕地拍打兔耳;1~2 min 內(nèi)兔耳上的血管即會(huì)充分地充盈。

(3)用一消毒過的解剖刀 的鋒尖在兔耳緣靜脈上迅速劃一長(zhǎng)約0.5 cm 的小口,收集兔血于50 ml 的塑料離心管中,直至傷口不再流血為止。

(4)使兔血順管壁下落,以避免發(fā)生溶血。
5. 將兔耳擦拭干凈,涂以70%乙醇,在耳朵傷口上涂一層凡士林,以減輕由乙醇產(chǎn)生的皮膚刺激感。
6. 將兔血在室溫下靜置數(shù)小時(shí)后置4 ℃過夜,用一木質(zhì)的撥棒將血凝塊輕輕地挑松并使之由離心管的側(cè)壁脫落,將血洧移到合適的離心管中,5 000 g 離心10 min,去除殘留的紅細(xì)胞及其他碎片。
7. 每?jī)尚瞧谶M(jìn)行進(jìn)一步的加強(qiáng)免疫。每次加強(qiáng)免疫后10天,可采集一次兔血,兔的兩只耳朵可輪流交替進(jìn)行采血。

8. 采用ELISA法或RIA法對(duì)血清中的特異性抗體進(jìn)行滴度測(cè)定。如果需要的話。


深圳安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術(shù)實(shí)力、壹流的經(jīng)營(yíng)管理水平和完善的市場(chǎng)銷售體系的生物高科技企業(yè)??偛吭O(shè)在廣東,服務(wù)面向全國(guó)。安培生物集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號(hào)傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線,在各個(gè)領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品,安培生物致力于為廣大的科研機(jī)構(gòu)、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。


會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言