如何高效將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染至293細(xì)胞系

關(guān)于293細(xì)胞系

293細(xì)胞(人胚腎細(xì)胞)系包括AAV293、HEK293、293T293F、293A等細(xì)胞株，是進(jìn)行病毒包裝和重組蛋白表達(dá)最為常用的工程細(xì)胞之一。特別是AAV293細(xì)胞，目前已成為腺相關(guān)病毒(AAV)包裝最為理想的宿主細(xì)胞，而AAV是目前基因治療的主要病毒載體之一；

Starvio 293細(xì)胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒

1：Starvio 293對(duì)293細(xì)胞的轉(zhuǎn)染陽性率可高達(dá)95%以上;

2：轉(zhuǎn)染后 24小時(shí)，細(xì)胞死亡率僅為5%左右。

3：Starvio 293使用也非常方便，先將轉(zhuǎn)染試劑與質(zhì)粒DNA混合，再將轉(zhuǎn)染試劑-DNA復(fù)合物直接加入培養(yǎng)細(xì)胞中;

4：血清不影響其轉(zhuǎn)染效果，不必刻意添加或更換培養(yǎng)液，操作十分簡便；

注意事項(xiàng)

1：第一次使用，建議進(jìn)行細(xì)胞密度優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，如可在24孔培養(yǎng)板中分別接種1.5x105、2.0x105、2.5x105個(gè)細(xì)胞，每孔各加入0.8ug質(zhì)粒 DNA，選擇出轉(zhuǎn)染效果較好的細(xì)胞接種密度;

2：轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)應(yīng)保持良好，不要有支原體污染；

3：應(yīng)避免轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備體系中存在血清，因血清會(huì)干擾Starvio 293與DNA形成復(fù)合物，培養(yǎng)基中盡量不要使用抗生素。

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