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當(dāng)前位置:深圳市安培生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>細(xì)胞培養(yǎng)中究竟要不要加抗生素?
簡介:
提到細(xì)胞污染,大家想到較多的是細(xì)胞中的細(xì)菌、渾濁的培養(yǎng)基、培養(yǎng)瓶中的非法入侵者等。此外,病毒和化學(xué)污染對細(xì)胞培養(yǎng)物的健康也非常重要,確保細(xì)胞株不存在交叉污染也是獲得可重復(fù)結(jié)果的關(guān)鍵因素。
控制污染的關(guān)鍵是如何檢測出污染。
細(xì)菌、真菌和酵母污染物通常是肉眼可見的,或許能迅速殺死細(xì)胞,但微妙的形態(tài)可能使重要的微生物入侵者像支原體一樣難以被檢測到。相比之下,傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡無法檢測到病毒,因此病毒污染通常是在觀察到無法解釋的分離、細(xì)胞健康較差的其他跡象或甚至是細(xì)胞死亡時(shí)才被發(fā)現(xiàn)的。
總結(jié):
抗生素雖然減少了可以觀察到的細(xì)菌、酵母等微生物的污染機(jī)會,卻會增加支原體、病毒等隱性污染的機(jī)會。
因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)中污染主要來源于空氣中的微粒和汽霧,而這些微粒和汽霧可以同時(shí)攜帶支原體、病毒和其他微生物。當(dāng)抗生素使用時(shí),可見污染被抑制而隱性污染又沒被注意到,這樣支原體、病毒等隱性污染的機(jī)會反而增加了。Barile的一項(xiàng)研究顯示72%持續(xù)使用抗生素培養(yǎng)的細(xì)胞有支原體污染,而不使用抗生素培養(yǎng)的細(xì)胞支原體污染的比例只有7%
反過來如果不使用抗生素,支原體、病毒的污染往往會伴隨細(xì)菌和酵母等的污染。由于細(xì)菌和酵母等的污染很容易觀察到,污染細(xì)胞的及時(shí)清理就大大減少了支原體、病毒的污染機(jī)會。
潛在的支原體、病毒的污染會帶來很大的危害。這些微生物的存在會影響細(xì)胞的理化性質(zhì),從而使研究者得到錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在嚴(yán)重的情況下,甚至使一個(gè)實(shí)驗(yàn)室數(shù)年的研究白白浪費(fèi)。
由于過濾技術(shù)的提高和超凈臺質(zhì)量的改進(jìn),在規(guī)范的細(xì)胞培養(yǎng)操作過程中引進(jìn)污染的機(jī)會已經(jīng)被大大降低了。所以比較合理的建議是,在常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)中不要使用抗生素。只有在培養(yǎng)污染源很多(比如組織培養(yǎng)),或者培養(yǎng)非常珍貴的細(xì)胞株時(shí)才使用抗生素。
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