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抗體芯片在腫瘤微環(huán)境研究上的應(yīng)用-癌細(xì)胞分泌關(guān)鍵蛋白質(zhì)

閱讀：1196 發(fā)布時間：2021-10-28
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Red 甘肅瑞德生物科技有限公司
文獻題目：Systemic Endocrine Instigation of Indolent Tumor Growth Requires Osteopontin
實驗用品：RayBiotech 人AAH-CYT-5抗體膜芯片（檢測80個生長因子抗體芯片）
實驗樣品：小鼠血漿
研究背景：腫瘤微環(huán)境一直是個研究熱點，腫瘤微環(huán)境中的基質(zhì)細(xì)胞對腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的形成起著重要的促進作用。然而對于移植瘤，宿主本身的微環(huán)境是否對腫瘤生長有促進作用，這方面的研究甚少。本文研究人員給實驗鼠同時移植了兩種癌細(xì)胞：一種是被稱為"煽動者"（instigator）的腫瘤細(xì)胞，是由可快速生長的乳腺癌細(xì)胞培養(yǎng)成的；另一種是生長緩慢只是偶然發(fā)生轉(zhuǎn)移的俗稱“回應(yīng)者"（responder）的癌細(xì)胞，這種癌細(xì)胞多數(shù)時間處于休眠狀態(tài)。研究人員發(fā)現(xiàn)，"煽動者"腫瘤細(xì)胞的存在加速“回應(yīng)者"癌細(xì)胞繁殖，使轉(zhuǎn)移的癌細(xì)胞驟增9倍。本文研究宿主微環(huán)境對腫瘤生長的促進作用以及揭示這種促進作用的分子機制。
研究思路：
1. 細(xì)胞系
Instigator"-BPLER 人乳腺癌細(xì)胞-移植瘤生長旺盛，有侵潤性，招募基質(zhì)細(xì)胞；
“Responder"-HMLER-HR人乳腺癌細(xì)胞---25%的小鼠移植瘤生長GFP+BMCs-骨髓源細(xì)胞
2. 小鼠移植瘤
對照組--同時移植Responder+基質(zhì)膠
實驗組--同時移植Responder+Instigator

接種Instigator腫瘤細(xì)胞30天后，Responders移植瘤生長加快，體積和質(zhì)量顯著增大。而對照組接種Matrigel的Responders移植瘤不生長。
3. 骨髓細(xì)胞BMC與腫瘤微環(huán)境的密切關(guān)系
接種Instigator的小鼠中，骨髓細(xì)胞BMC進入血液循環(huán)流動到Responders移植瘤中，從而促進Resp onders移植瘤的快速增長。
4. 骨髓細(xì)胞BMC單獨作用

提取對照組小鼠、接種Instigator的小鼠以及接種Non-Instigator小鼠的骨髓細(xì)胞，分別于與Respon ders混合后注射小鼠，得到同樣的效果，接種Instigator的小鼠骨髓細(xì)胞可以使Responders移植瘤生長增大。
5. RayBiotech芯片探討Instigator腫瘤細(xì)胞如何與宿主骨髓細(xì)胞交流信息
RayBiotech抗體芯片AAH-CYT-5篩選接種Instigator的小鼠以及接種Non-Instigator小鼠血漿中腫瘤細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子差異，結(jié)果顯示，接種Instigator的小鼠血漿中osteopontin骨橋蛋白表達量是接種Non-Instigator小鼠的3倍，顯著性差異。其他因子無差異。骨橋蛋白是一種分泌型糖蛋白，對炎癥、血管及腫瘤轉(zhuǎn)移等起重要作用。芯片結(jié)果揭示骨橋蛋白可能是腫瘤和骨髓細(xì)胞相互交流的關(guān)鍵。
6. Instigator腫瘤細(xì)胞喚醒Responder細(xì)胞的分子機制
實驗結(jié)果：
隨后的分析顯示，“骨橋蛋白“是這種“煽動者"腫瘤細(xì)胞發(fā)揮作用的關(guān)鍵所在。研究人員于是阻止癌細(xì)胞中“骨橋蛋白"的生產(chǎn)，結(jié)果“煽動者"腫瘤細(xì)胞繼續(xù)生長繁殖，卻不再刺激“回應(yīng)者"細(xì)胞。研究人員由此認(rèn)為，這種蛋白質(zhì)會"喚醒"體內(nèi)休眠的癌細(xì)胞，幫助它們占領(lǐng)新組織。RayBiotec h的抗體芯片在該機制研究中發(fā)揮了不可替代的作用。

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