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從肝臟組織中制備細胞核2022/9/14
一、材料與儀器:大鼠、裂解緩沖液、濃蔗糖溶液、超速離心機、組織研磨器二、實驗步驟:1.配制裂解緩沖液和濃蔗糖溶液(PMSF在使用前添加),冰上放置。裂解緩沖液:①0.25mol/L蔗糖網(wǎng)織紅細胞標準緩...
從哺乳動物細胞或組織分離DNA2022/9/9
材料與儀器:細胞、TBS抽提緩沖液、離心管實驗步驟:步驟1:根據(jù)樣品類型,從下列方法中選一個作為步驟1進行操作。(1)細胞樣品①單層培養(yǎng)的細胞以用冰預冷的TBS將單層細胞洗滌2次,用刮棒把細胞刮入約0...
細胞凍存和復蘇實驗2022/9/1
實驗方法原理:細胞凍存和復蘇的基本原理是慢凍快解凍,已被證明能最大限度地提高細胞活力。目前常用甘油或二甲基亞砜作為細胞低溫保存的保護劑。這兩種物質(zhì)可以提高細胞膜對水的滲透性,再加上緩慢的冷凍可以使細胞...
標記細胞株要如何保存?2022/8/9
細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后即為細胞系,由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系所組成。如果不...
細胞培養(yǎng)基介紹2022/7/14
細胞培養(yǎng)基的概念01細胞培養(yǎng)基是人工模擬細胞在體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境,并提供細胞營養(yǎng)和促進細胞生長增殖的基礎物質(zhì)。細胞培養(yǎng)基是細胞培養(yǎng)的基礎,它為動物細胞的健康快速成長提供營養(yǎng)物質(zhì)。所以,只要用到細胞進行...
C57小鼠皮膚成纖維細胞原代培養(yǎng)的方法2022/7/14
實驗方法1.將實驗小鼠脫頸處死,75%乙醇浸泡5min,固定,備皮,取背部皮膚至于含雙抗的冷PBS緩沖液中。2.仔細剝離脂肪,血管等多余組織,PBS清洗,加胰酶消化1h。3.分離真表皮,去除表皮后,P...
說說關(guān)于細胞外泌體研究的幾個重要問題2022/7/6
外泌體是細胞分泌到胞外的一種囊泡,其大小為30-150nm,具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),含有豐富的內(nèi)含物(包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等),參與細胞間的分子傳遞。外泌體廣泛存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,細...
SD大鼠乳鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞原代分離培養(yǎng)方法2022/7/5
1.將新生24h的SD大鼠用75%乙醇浸泡5min,開胸,取出心臟后于含有雙抗的預冷過的D-HANKS中漂洗兩遍,移入超凈臺。2.仔細剪除大血管,左右心房及右心室和室間隔,保留左心室,去除內(nèi)、外膜,P...
新生SD大鼠大腦皮層神經(jīng)元原代分離培養(yǎng)方法2022/6/30
一.實驗方法1.多聚賴氨酸(Poly-D-Lysine)包被培養(yǎng)板的制備:原代分離進行前一天,用PBS緩沖液配制終濃度為0.1mg/ml的多聚賴氨酸工作液,0.22μm濾膜過濾除菌,于超凈工作臺內(nèi)吸取...
原代細胞分離培養(yǎng)都有哪幾種方法?2022/6/14
研究中常用的細胞系/株系是現(xiàn)成的,我們只需要進行細胞傳代和種子保存。然而,這些細胞系往往因長期體外培養(yǎng)而失去原有的生物學特性,對藥物治療的反應差距越來越大。因此,越來越多的人選擇原代細胞。來源于胚胎、...
充質(zhì)干細胞涉及的研究竟然這么多2022/5/11
充質(zhì)干細胞是人體內(nèi)一類具有自我更新和多向分化潛能的原始細胞群。根據(jù)遺傳來源的分類,干細胞可分為胚胎干細胞和成體干細胞。其中,胚胎干細胞具有發(fā)育全能性,是干細胞研究和應用中具吸引力的一種。然而,關(guān)于胚胎...
原代細胞分離培養(yǎng)有哪些注意事項?2022/4/13
原代細胞分離培養(yǎng)有哪些注意事項?1、組織塊培養(yǎng)法(1)接種后的前3天,觀察和移動時注意不要引起液體振蕩。避免頻繁的翻倒和振動,否則組織塊不易附著在瓶壁上或附著后脫落飄浮。(2)加入的培養(yǎng)基不宜過多,以...
充質(zhì)干細胞的醫(yī)療價值真的很高2022/3/15
充質(zhì)干細胞是一種早期未分化細胞,具有自我更新、自我復制、無限增殖和多向分化潛能等特點。它們可以分泌細胞因子,減輕炎癥,減少組織細胞凋亡,促進內(nèi)源性組織器官干祖細胞的增殖,進行免疫調(diào)節(jié),從而達到作為種子...
腸道腫瘤類器官的研究與應用2022/2/23
ONCOGENESIS|腸道腫瘤類器官的應用研究類器官(Organoids)類器官是一項創(chuàng)新性較高的研究技術(shù),近幾年來受到科研人士的追捧和廣泛好評。目前,我們國家在政策層面也給予了大力地支持。2021...
細胞污染的辨別2022/2/23
細胞污染的辨別細胞污染有很多種不同的類型,不同情況的細胞污染其表現(xiàn)也不同,檢測方法也有所不同。不過大部分的細胞污染,用肉眼加鏡檢就可以解決啦!細胞污染一般分細菌污染,真菌污染,支原體污染,黑膠蟲等。1...

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