衍生化是指被測物質(zhì)與相應(yīng)的試劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)
閱讀:1719 發(fā)布時間:2022-3-10
衍生化是指被測物質(zhì)與相應(yīng)的試劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng),改變被測物質(zhì)的化學(xué)和物理性質(zhì),提高被測物質(zhì)的檢測靈敏度,改善被測物質(zhì)混合物的分離度,從而達(dá)到利于分析的目的。衍生化在HPLC分析中應(yīng)用廣泛,其中在線柱后衍生使用居多。傳統(tǒng)的在線柱后衍生需要一個獨(dú)立的泵來輸送衍生試劑以實(shí)現(xiàn)衍生的目的,但這些額外的獨(dú)立裝置有時由于與液相色譜系統(tǒng)本身不能進(jìn)行很好的聯(lián)用,往往導(dǎo)致運(yùn)行不甚理想。
柱后衍生裝置由于具有兩個獨(dú)立的泵和流路,一個泵進(jìn)行分析,另外一個泵可以完成如輸送衍生試劑等的輔助功能,可以很好地實(shí)現(xiàn)在線柱后衍生應(yīng)用,而且這些功能很多情況只需要一個簡單的柱后三通或反應(yīng)管的連接就可以實(shí)現(xiàn)。此外,在HPLC和MS聯(lián)用時,為了增強(qiáng)離子化效率,需要另外的流路泵入甲酸或乙腈,使用賽默飛雙三元液相色譜系統(tǒng)也可以簡單方便地實(shí)現(xiàn)這樣的功能。
反梯度補(bǔ)償技術(shù)是指在色譜柱后進(jìn)入檢測器前加入另一與分析時溶劑組成相同但比例相反的溶劑,使進(jìn)入檢測器的溶劑濃度保持不變,從而使檢測條件更加穩(wěn)定,提高檢測效果。當(dāng)使用基于霧化機(jī)理的檢測器進(jìn)行梯度分析時,由于被測物質(zhì)的響應(yīng)值與霧化效率密切相關(guān),而流動相的組成是影響霧化效率的重要因素,但由于梯度分析時流動相的組成在不斷改變,樣品中各組分的霧化效率也隨著在不斷變化,這將直接影響待測物質(zhì)響應(yīng)的一致性。使用柱后衍生裝置,通過應(yīng)用反梯度補(bǔ)償技術(shù)可以避免該因素對檢測的影響,從而實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)物的準(zhǔn)確分析。