展青霉素檢測應(yīng)用方案
展青霉素易溶于水、氯仿、丙酮、乙醇及乙酸乙酯等有機溶劑,微溶于乙醚、苯,不溶于石油醚。在酸性環(huán)境中展青霉素非常穩(wěn)定,在堿性條件下活性降低,具有不飽和內(nèi)酯的某些特性,易與含巰基(-SH)化合物反應(yīng)。不飽和雜環(huán)內(nèi)酯。檢測方法主要有薄層色譜法(TLC)氣相色譜法(GC)高效液相色譜法(HPLC)酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用。
研究發(fā)現(xiàn),展青霉素的作用具有兩重性。一方面,它具有廣譜抗菌作用,可抑制多種革蘭氏陽性菌及大腸桿菌、痢疾桿菌、傷寒、副傷寒桿菌等革蘭氏陰性菌,對某些典型真菌、原生生物和各種細(xì)胞培養(yǎng)物的生長有抑制作用;另一方面,它又對小鼠、大鼠、貓、魚等實驗動物有較強的毒性。展青霉素污染食品和飼料后產(chǎn)生的毒性作用遠(yuǎn)大于其藥用價值,因此它沒有被作為抗生素使用而是作為生物毒素進行了研究。
本方法主要采用液相色譜-衍生法(萊博瑞特光化學(xué)衍生儀)測試展青霉素。
1、 儀器
液相色譜儀、紫外檢測器、輸液泵、自動進樣器、系統(tǒng)控制器、柱溫箱、萊博瑞特光化學(xué)衍生儀
2、 色譜條件
檢測波長:276nm
流動相:A甲醇,B水,C乙腈(梯度洗脫)
流速:0.9mL/min
柱溫:室溫
3、 檢測
展青霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液:0.1ug/mL
標(biāo)準(zhǔn)溶液制備:甲醇稀釋,0.45μm過濾膜過濾,進樣20uL
出峰時間:5.973min
圖1展青霉素