目錄:大連板橋醫(yī)療器械有限公司>>新藥研發(fā)&生物工藝>> LBIS牛血清白蛋白ELSIA試劑盒
| 供貨周期 | 一個月 |
|---|
LBIS牛血清白蛋白ELSIA試劑盒
LBIS Bovine Albumin ELISA Kit
白蛋白存在于細胞和體液中，主要類型為高水溶性的蛋白，同時也存在糖基化的白蛋白。血清白蛋白分子量約為69 kDa，占血漿蛋白56-60%，等電點為4.9，在肝細胞中合成。
血清白蛋白是血清蛋白的主要組成部分，在維持滲透壓中起重要作用，在生理上與脂肪酸、dan紅素和甲狀腺素等難溶于水的物質(zhì)結(jié)合，并協(xié)助其運輸。血清白蛋白濃度的降低，通常是由于肝硬化等引發(fā)的白蛋白生物合成減少、營養(yǎng)不良或熱性病損耗的體蛋白所導致的血液中白蛋白的消耗，以及腎障礙引起的尿液滲出等原因所致。
在健康人的尿液中，血清白蛋白的排泄量每天僅在30 mg以下，但由于患腎臟疾病時滲出至尿液的白蛋白會增多，因此患腎小球腎炎、腎病綜合征、糖尿病性腎病等腎臟疾病時的尿白蛋白水平會升高。另外，發(fā)燒、高血壓、充血性心力衰竭、尿路感染等情況下，尿白蛋白水平也有可能會升高。即使是健康人，在經(jīng)過劇烈運動或肌肉勞動后、熱水沐浴后、精神興奮、壓力和攝入大量蛋白后以及月經(jīng)前，尿白蛋白會短暫性增加，這種現(xiàn)象也被稱為生理性或功能性蛋白尿或運動性蛋白尿。此外，僅在站立時才出現(xiàn)的蛋白尿主要發(fā)現(xiàn)于年輕人中。
人類中有一種罕見的先天性疾病，稱為低白蛋白血癥，也稱為無白蛋白血癥，但正確來說是含有極少量白蛋白，臨床癥狀為輕度水腫和中度低血壓，尚未觀察到肝功能異常或蛋白尿。動物中大鼠有無白蛋白血癥analbuminemia的模型，是由佐佐木研究所的Sumi Nagase老師以SD大鼠建立的，被稱為NAR（Nagase analbuminemia rat)。
血清白蛋白的檢測，使用TIA檢測系統(tǒng)宏觀上效果不錯，FUJIFILM Wako Shibayagi也可以提供大鼠和小鼠的自動檢測儀器用TIA試劑盒，然如果要實現(xiàn)高靈敏度和微量檢測則需用到ELISA。富士膠片和光Shibayagi的LBIS Albumin ELISA Kit除了可定量檢測血液中、尿液中與疾病相關(guān)的白蛋白外，還可應(yīng)用于體外白蛋白生物合成實驗系統(tǒng)、從培養(yǎng)體系中純化得到的生物藥中FBS等的殘留污染檢測，NAR中肝細胞和肝組織移植后白蛋白產(chǎn)生的標記成功與否的研究等等。
◆試劑盒特點
● 可快速檢測（總反應(yīng)時間：2.5 h）
● 檢測范圍：0.78~50 ng/mL
● 所需樣品量：100 μL/well
● 使用環(huán)保的防腐劑
● 所有試劑均為即開即用的溶液
● 高檢測準確性和可重復性
使用目的
● 檢測培養(yǎng)基來源的牛血清白蛋白（BSA/FBS）
● 細胞和組織加工產(chǎn)品
● 單克隆抗體生產(chǎn)工藝
● 重組蛋白生產(chǎn)工藝
◆試劑盒的組成
組成內(nèi)容 | 狀態(tài) | 包裝 |
（A）抗體固定96孔板（干板型） | 清洗后使用 | 96 wells（8×12）/1支 |
（B）標準白蛋白溶液（500 ng/mL） | 稀釋后使用 | 200 μL/1支 |
?。–）緩沖液 | 直接使用 | 60 mL/1支 |
（D）過氧化物酶結(jié)合抗白蛋白抗體 | 稀釋后使用 | 200 μL/1支 |
?。‵）顯色液（TMB） | 直接使用 | 12 mL/1支 |
?。℉) 反應(yīng)停止液（1M H2SO4） ※ 使用注意 | 直接使用 | 12 mL/1支 |
?。↖）濃縮清洗液（10×） | 稀釋后使用 | 100 mL/1支 |
封板膜 | —— | 3張 |
使用說明書 | —— | 1份 |
◆交叉反應(yīng)性
物種 | 交叉反應(yīng)率（%） |
牛 | 100% |
小鼠 | 小于0.05% |
大鼠 | 小于0.05% |
人 | 小于0.05% |
※ 交叉反應(yīng)率為1000 ng/mL濃度下檢測的數(shù)據(jù)。
◆樣品信息
檢測樣品中牛白蛋白殘留污染
※ 檢測時，制備合適倍率的緩沖液，用作檢測用的稀釋樣品。
※ 請注意本試劑盒對于檢測牛血清·血漿樣品十分敏感。需稀釋約一百萬倍。
◆檢測范圍
0.78～50 ng/mL（標準曲線范圍）
◆Validation data
準確度測試（實驗組內(nèi)差異）
樣品 | A | B | C | D |
1 | 46 | 23.9 | 11.7 | 1.72 |
2 | 45.3 | 23.5 | 11.8 | 1.84 |
3 | 43.9 | 24.2 | 11.5 | 1.7 |
4 | 44.8 | 22.5 | 11.4 | 1.76 |
5 | 48 | 24.7 | 12.3 | 1.75 |
mean | 45.6 | 23.8 | 11.7 | 1.75 |
SD | 1.561 | 0.825 | 0.353 | 0.053 |
CV（%） | 3.4 | 3.5 | 3 | 3 |
單位：ng/mL
可重復性測試（實驗組間差異）
檢測日/樣品 | E | F | G |
第0日 | 1.48 | 5.7 | 24.3 |
第1日 | 1.55 | 6.2 | 25.6 |
第2日 | 1.5 | 6.35 | 25 |
第3日 | 1.56 | 6.25 | 25 |
mean | 1.52 | 6.12 | 25 |
SD | 0.042 | 0.288 | 0.545 |
CV（%） | 2.8 | 4.7 | 2.2 |
單位：ng/mL n=3
加標回收測試
樣品 H
添加量 | 實測值 | 回收量 | 回收率 |
0 | 3.06 | - | - |
1.5 | 4.58 | 1.52 | 101 |
3 | 5.8 | 2.74 | 91.3 |
3.75 | 6.79 | 3.73 | 99.5 |
單位：ng/mL n=3
樣品 I
添加量 | 實測值 | 回收量 | 回收率 |
0 | 10.6 | - | - |
3.95 | 14.7 | 4.1 | 104 |
11.9 | 22.3 | 11.7 | 98.3 |
19.8 | 29.4 | 18.8 | 94.9 |
單位：ng/mL n=3
◆稀釋直線性測試
使用連續(xù)性稀釋緩沖液分4個階段梯度稀釋2個血清樣品，并進行檢測，結(jié)果顯示直線回歸的R2從0.9996變?yōu)榱?.9997。
◆操作方法
抗體包被96孔板（干板型）
↓ 清洗4次
樣品或標準溶液 100 μL
↓ 攪拌，室溫(20～25 ℃)，靜置反應(yīng)1 h
↓ 清洗4次
過氧化物酶結(jié)合抗白蛋白抗體 100 μL
↓ 攪拌，室溫(20～25 ℃)，靜置反應(yīng)1 h
↓ 清洗4次
顯色液（TMB） 100 μL
↓ 攪拌，室溫(20～25 ℃)，靜置反應(yīng)30 min
反應(yīng)終止液（1M H2SO4）
↓ 攪拌
吸光度檢測（主波長450 nm、副波長620 nm：600～650 nm）
◆FBS/FCS，液體培養(yǎng)基檢測示例
樣品 | 白蛋白檢測值(mg/mL) |
FBS-1 | 17.3 |
FBS-2 | 17.3 |
FCS-1 | 10.5 |
FCS-2 | 12.5 |
RPMI-1(10 %FBS) | 1.39 |
RPMI-2(10 %FBS) | 1.73 |
◆牛血清白蛋白（BSA）檢測用試劑
牛血清白蛋白（BSA：Bovine Serum Albumin）
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 標準曲線范圍 | 樣品量 |
635-07099 | LBIS Bovine Albumin ELISA kit LBIS牛白蛋白 ELISA試劑盒 | 0.78～50 ng/mL | 100 μL |
已經(jīng)驗證可以檢測樣品中摻入的牛血清白蛋白，以及來源于生產(chǎn)過程的終產(chǎn)品中牛血清白蛋白殘留雜質(zhì)。
本產(chǎn)品僅供實驗研究用，不可作臨床應(yīng)用。
5
化工儀器網(wǎng)