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中級(jí)會(huì)員 | 第3年

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關(guān)于細(xì)胞后綴-LUC、-GFP、RFP的名詞解釋

時(shí)間:2023/12/21閱讀:2759
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LUC(Luciferase):

熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱(chēng),其中最有代表性的是來(lái)自北美螢火蟲(chóng)(Photinus pyralis)體內(nèi)的熒光素酶。螢火蟲(chóng)熒光素酶屬于加氧酶(oxygenase),其發(fā)光反應(yīng)需要O2和Mg2+參與;有輔酶A(CoA)存在時(shí)能提高反應(yīng)效率,增加發(fā)光時(shí)間。螢火蟲(chóng)熒光素酶無(wú)需翻譯后修飾,即可表現(xiàn)出熒光素酶活性。將螢火蟲(chóng)熒光素酶的基因插入慢病毒介導(dǎo)的載體中,通過(guò)CAG啟動(dòng)子過(guò)表達(dá)從而作為報(bào)告基因,在細(xì)胞中表達(dá)。常用于細(xì)胞標(biāo)記后小動(dòng)物細(xì)胞移植活體成像追蹤,從而評(píng)估移植后細(xì)胞的歸巢以及治療效果等。


GFP(Green Fluorescent Protein):

綠色熒光蛋白1962年在一種學(xué)名Aequoreavictoria的水母中發(fā)現(xiàn)。其基因所產(chǎn)生的蛋白質(zhì),在藍(lán)色波長(zhǎng)范圍的光線激發(fā)下,會(huì)發(fā)出綠色螢光。這個(gè)發(fā)光的過(guò)程中還需要冷光蛋白質(zhì)Aequorin的幫助,且這個(gè)冷光蛋白質(zhì)與鈣離子(Ca2+)可產(chǎn)生交互作用。將綠色熒光蛋白的基因插入慢病毒介導(dǎo)的載體中,通過(guò)flap-Ub啟動(dòng)子過(guò)表達(dá)從而作為報(bào)告基因,在細(xì)胞中表達(dá)。常用于細(xì)胞標(biāo)記后移植追蹤,從而評(píng)估移植后細(xì)胞的歸巢以及治療效果等。


RFP是(Red Fluorescent Protein):

紅色熒光蛋白,目前使用的是 mCherry一種來(lái)自于蘑菇珊瑚(mushroom coral)的紅色熒光蛋白,常有于標(biāo)記和示蹤某些分子和細(xì)胞組分。


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