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超聲波轉(zhuǎn)染儀具有轉(zhuǎn)染效率高的優(yōu)點(diǎn)

時間:2022-5-7 閱讀:14901
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  轉(zhuǎn)染是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類,一類是瞬時轉(zhuǎn)染,一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染(轉(zhuǎn)染)。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例;化學(xué)介導(dǎo)方法很多,如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù);生物介導(dǎo)方法,有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染,和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。
 
  超聲波轉(zhuǎn)染儀具有轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞毒性小等優(yōu)點(diǎn)。病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù),是目前轉(zhuǎn)染效率高的方法,同時具有細(xì)胞毒性很低的優(yōu)勢。但是,病毒轉(zhuǎn)染方法的準(zhǔn)備程序復(fù)雜,常常對細(xì)胞類型有很強(qiáng)的選擇性,在一般實(shí)驗(yàn)室中很難普及。其它物理和化學(xué)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法,則各有其特點(diǎn)。需要指出的一點(diǎn),無論采用哪種轉(zhuǎn)染技術(shù),要獲得轉(zhuǎn)染結(jié)果,可能都需要對轉(zhuǎn)染條件進(jìn)行優(yōu)化。影響轉(zhuǎn)染效率的因素很多,從細(xì)胞類型、細(xì)胞培養(yǎng)條件和細(xì)胞生長狀態(tài),到轉(zhuǎn)染方法的操作細(xì)節(jié),都需要考慮。
 
  超聲波轉(zhuǎn)染儀綜合應(yīng)用傳統(tǒng)的電穿孔技術(shù)及細(xì)胞特異性細(xì)胞核轉(zhuǎn)染液,通過調(diào)整優(yōu)化的電轉(zhuǎn)參數(shù)(內(nèi)存轉(zhuǎn)染程序),直接把外源基因?qū)朐?xì)胞及細(xì)胞系的細(xì)胞漿和細(xì)胞核中。它不同于傳統(tǒng)的電穿孔儀,因?yàn)樗梢园淹庠椿蛑苯訉?dǎo)入核中,而且細(xì)胞存活率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于電穿孔儀。它可以直接將DNA轉(zhuǎn)染到細(xì)胞核內(nèi),因此實(shí)現(xiàn)了因受到細(xì)胞分裂限制而一直困擾人們的原代細(xì)胞的高效率轉(zhuǎn)染。在該儀器的使用下,您可以在腫瘤研究、免疫學(xué)、組織工程學(xué)及心血管疾病研究領(lǐng)域中輕而易舉地獲得大于90%的高效率基因轉(zhuǎn)染率。

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