細(xì)胞拉伸培養(yǎng)儀是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi),再進(jìn)行培養(yǎng)的過(guò)程。對(duì)單層培養(yǎng)而言,80%匯合或剛匯合的細(xì)胞是較理想的傳代階段。原代細(xì)胞培養(yǎng):與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上相似性大。由于培養(yǎng)的細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來(lái),故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段。同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。傳代細(xì)胞培養(yǎng):當(dāng)原代培養(yǎng)成功以后,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)和細(xì)胞不斷分裂,一則細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制,生長(zhǎng)速度減慢甚至停止;另一方面也會(huì)因營(yíng)養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長(zhǎng)或發(fā)生中毒。
細(xì)胞拉伸培養(yǎng)儀為什么要倒置培養(yǎng):
1)由于重力的作用使培養(yǎng)基表面及次層能富集微生物生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),利于微生物生長(zhǎng)。
2)防止空氣中微生物的污染培養(yǎng)基及培養(yǎng)物:倒置時(shí)平板內(nèi)的空氣是不流動(dòng)的,雜菌不會(huì)沉降到培養(yǎng)基表面,如果不倒置,很快平板周邊會(huì)長(zhǎng)起雜菌。
3)倒置培養(yǎng)使瓊脂里水分不易蒸發(fā)出去,而充分的保持瓊脂的彈性與細(xì)菌容易繁殖和生存的環(huán)境。如果不倒置,大概3天左右培養(yǎng)基就會(huì)出現(xiàn)龜裂等水分散失的情況。 而一些落菌等試驗(yàn),需驗(yàn)證培養(yǎng)基無(wú)菌,就要先倒置培養(yǎng)48小時(shí)才可作為模板做落菌,水分散失是很重要的。
原代細(xì)胞培養(yǎng):將動(dòng)物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機(jī)械方法處理,分散成單細(xì)胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖,這一過(guò)程稱原代培養(yǎng)。
傳代細(xì)胞培養(yǎng):當(dāng)細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中長(zhǎng)滿后就需要將其稀釋分種成多瓶,細(xì)胞才能繼續(xù)生長(zhǎng)。這一過(guò)程就叫傳代。傳代培養(yǎng)可獲得大量細(xì)胞供實(shí)驗(yàn)所需。傳代要在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下進(jìn)行,每一步都需要認(rèn)真仔細(xì)的無(wú)菌操作。