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重組增強型綠色熒光蛋白
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重組增強型綠色熒光蛋白
綠色熒光蛋白(greenfluorescentprotein,簡稱GFP)是一種能在藍色波長光線激發(fā)下發(fā)出熒光的特殊蛋白質,正是這種神奇的性質,讓它成為當今生物化學領域較有力的工具之一,被稱為“生物北斗"。GFP在科學研究上有著驚人的用途,因為它能夠使我們直接看到細胞內(nèi)部的運動、分布情況。在任何特定的時間我們都可以輕易地找出GFP的定位和存在:你只需要用紫外光去照射,這時所有的GFP都將發(fā)出鮮艷的綠色光芒。顯微鏡下的微觀世界與我們看到的宏觀世界極為不同,而GFP的作用是在微觀與宏觀間架起一座橋梁,讓科學家通過觀察發(fā)光效應推測出物質在分子水平上的活動。讓生物化學家們在研究細胞、蛋白、基因的水平上,從顯微鏡下獲得滿意的結果。 綠色螢光蛋白在細胞生物學與分子生物學領域中,通常被用作為一個報導基因(reporter gene)。一些經(jīng)修飾過的型式可作為生物探針,由于GFP熒光有著生物細胞的自主功能,其熒光的產(chǎn)生不需要任何外源反應底物,因此GFP作為一種廣泛應用的活體報告蛋白,其作用是任何其它酶類報告的蛋白是比不上的。
簡單做個實驗:把GFP連接到你有興趣觀察的任何對象上。比如,你可以把它連接到一種病毒上。然后,隨著病毒在宿主體內(nèi)不斷擴散,你就可以通過跟蹤發(fā)出的綠色螢光來觀察病毒的擴散途徑;或者你把它接合到一種蛋白質上并通過顯微鏡觀察它在細胞內(nèi)部的移動或遷移。
目前由我公司自主研發(fā)的重組增強型綠色螢光蛋白及相關抗體,是目前較為優(yōu)質的蛋白和抗體。
GFP在腫瘤發(fā)病機制研究中的應用
GFP是一個分子量較小的蛋白,易與其他一些目的基因形成融合蛋白且不影響自身的目的基因產(chǎn)物的空間構象和功能。GFP與目的基因融合,將目的基因標記為綠色,若將熒光蛋白植入到動物的某個細胞的DNA分子結構中,可定量分析目的基因的表達水平,顯示其在腫瘤細胞內(nèi)的表達位置和量的變化,為探討該基因在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用及其分子機制,提供了便利條件。
在腫瘤的形成過程中,增殖和凋亡是一對相互矛盾的統(tǒng)一體。若腫瘤細胞凋亡占優(yōu)勢,腫瘤組織將長期處于休眠狀態(tài)或自行消亡。腫瘤細胞的凋亡受凋亡相關基因調控。用GFP轉染腫瘤細胞凋亡相關基因,并與正常組織進行比較,則大致可判斷此基因為抑制腫瘤細胞凋亡的基因;反之,為促進腫瘤細胞凋亡的基因。
腫瘤細胞浸潤是腫瘤細胞粘連、酶降解、移動和基質內(nèi)增殖等一系列過程的表現(xiàn),其根本原因在于腫瘤細胞內(nèi)某些基因表達異常。利用GFP 的示蹤特性,研究腫瘤細胞內(nèi)某些基因異常表達與腫瘤細胞浸潤的關系,即可揭示腫瘤細胞浸潤的某些機制。