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應(yīng)用干貨 | 輕松解鎖寡核苷酸純化解決方案
研究表明，合成寡核苷酸和核酸是極具前景的治療藥物，也是用于研究和診斷二代測序（NGS）的重要組成部分。這些寡核苷酸的大小、序列復(fù)雜度和整體修飾存在差異。小寡核苷酸的大小范圍從幾個(gè)核苷酸到 40 或50 個(gè)堿基，并包含不同的 DNA 或 RNA 修飾。除了它們的一級結(jié)構(gòu)外，這些分子可以為單鏈或雙鏈結(jié)構(gòu)，并包含分子或生物標(biāo)簽修飾。較大的分子（包括向?qū)NA 或 NGS 引物和探針）包含 50–200 個(gè)堿基，并根據(jù)其具體應(yīng)用添加了不同的修飾和標(biāo)簽。RNA 治療藥物的序列可能包含數(shù)千個(gè)堿基，其通過體外生產(chǎn)合成，需要考慮*的純化要求。
序列衍生的結(jié)構(gòu)形成和雜質(zhì)與全長產(chǎn)物相似，因此優(yōu)化純化和分析流程對于開發(fā)終的純分子至關(guān)重要。
多樣化的分子
然而，寡核苷酸的多樣性要求填料具有多種粒徑和孔徑，能夠應(yīng)對純化和分析挑戰(zhàn)。PLRP-S 和 PL-SAX 等聚合物顆粒填料是分析和純化寡核苷酸的理想選擇。由于這些材料具有熱穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性，因此可以實(shí)現(xiàn)多種技術(shù)的應(yīng)用：
01
在高溫下運(yùn)行可以加快傳質(zhì)，提高長鏈寡核苷酸的分離度
02
高 pH 等變性條件可用于避免在分析和純化過程中修飾、自我互補(bǔ)和富含 GC 的寡核苷酸聚集
03
在高 pH 條件下進(jìn)行陰離子交換可以抑制單個(gè)堿基的電離，從而能夠分離寡核苷酸的磷酸二酯和硫代磷酸酯形式
輕松滿足各種純化需求：從 siRNA 到 mRNA
安捷倫了解寡核苷酸的多樣性，無論分子大小或純化規(guī)模如何，都能為您提供合適的填料和孔徑。Agilent PLRP-S 和 PL-SAX 色譜柱都能為您提供出色的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性。此外，它們有多種孔徑可供選擇，能夠滿足您*的寡核苷酸純化需求。
對于寡核苷酸等大分子而言，選擇合適的孔徑是需要考慮的一個(gè)重要因素。安捷倫提供一系列孔徑，以平衡分離度和結(jié)合容量。
Agilent PLRP-S 色譜柱
小規(guī)模分析的理想選擇，并可隨著生產(chǎn)需求的增長而擴(kuò)展
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反相填料 – 用于離子對反相模式
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五種孔徑：100 ?、200 ?、300 ?、1000 ? 和 4000 ?
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填料粒徑范圍從 3 µm 到 50 µm
Agilent PL-SAX 色譜柱
無論是向?qū)?RNA 還是核酸大分子，都能為您提供所需的純度
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出眾的聚合物陰離子交換填料
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兩種孔徑：1000 ? 和 4000 ?
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填料粒徑范圍從 5 µm 到 30 µm
結(jié)語
從分析級、半制備級和制備級規(guī)模到散裝材料，在所需的規(guī)模擁有相同質(zhì)量的固定相至關(guān)重要，Agilent PLRP-S 和 PL-SAX 色譜柱使您無論生產(chǎn)規(guī)模如何，都可以使用相同的優(yōu)化填料。
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寡核苷酸純化解決方案
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