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微生物快速鑒定質(zhì)譜在分析蛋白質(zhì)中的應(yīng)用

閱讀:306      發(fā)布時間:2022-3-23
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  微生物快速鑒定質(zhì)譜技術(shù)作為強大的技術(shù)分析,在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域已有較長的應(yīng)用歷史。由于這些技術(shù)靈敏度高、特異性強、且能夠同時檢測多種化合物的特點,在西方國家的臨床診斷應(yīng)用研究工作中得到了十分快速的發(fā)展,為疾病的診斷、預(yù)后和治療以及人體健康的評估等做出了*而重要的貢獻(xiàn)。
 
  微生物快速鑒定質(zhì)譜儀的性能包括分辨率、敏感度或探測極限和準(zhǔn)確性等,這些性能都與質(zhì)譜儀的類型、采用的離子化方法和掃描能力有關(guān)。不過沒有哪一個儀器能同時在上述所有方面都占優(yōu),在選擇儀器的時候要根據(jù)實驗需要進(jìn)行相應(yīng)的取舍。
 
  質(zhì)譜儀通常使用的都是離子模式來鑒定蛋白質(zhì)的氨基酸序列。目前所有的MS/MS質(zhì)譜儀都具有該功能。不過其它特殊的質(zhì)譜儀也具有MS/MS功能。如果要發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)中的某個功能基團(tuán)則需要用到母離子掃描功能或者中性丟失掃描功能。
 
  而這就要用到三重四級桿質(zhì)譜儀,或四級桿離子阱質(zhì)譜儀,比如復(fù)雜混合物里的蛋白質(zhì)磷酸化位點和糖基化位點就都可以用這種方法(在碰撞池中產(chǎn)生特殊的報告離子,通過它來進(jìn)行特殊的功能檢測)檢測出來。
 
  在一個典型的質(zhì)譜檢測試驗中,首先先用母離子掃描或中性丟失掃描都能發(fā)現(xiàn)目標(biāo)組分,然后再用傳統(tǒng)的MS/MS方法鑒定蛋白質(zhì)的氨基酸序列以及定位修飾位點。
 
  已知的或未知的分析物都以高的敏感度和選擇性能被定量檢測出來。這種高選擇性得益于質(zhì)譜儀能夠?qū)Υ硪粋€肽段的一對母離子和片段裂解物離子進(jìn)行實時監(jiān)測。

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