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酶標(biāo)儀的選購(gòu)需要考慮哪些參數(shù)要求

閱讀:414      發(fā)布時(shí)間:2023-2-2
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  酶標(biāo)儀作為一個(gè)常用的儀器,其基本功能不外乎一個(gè)比色測(cè)定,與比色計(jì)所不同的是在測(cè)定波長(zhǎng)范圍、吸光度范圍、光學(xué)系統(tǒng)、檢測(cè)速度、震板功能、溫度控制、定性和定量測(cè)定軟件功能等方面的差異,當(dāng)然全自動(dòng)酶免疫分析系統(tǒng)還具有自動(dòng)洗板、溫育、加樣等功能。我們?cè)谶x購(gòu)酶標(biāo)儀時(shí)應(yīng)該考慮如下幾個(gè)關(guān)鍵參數(shù):
  濾光系統(tǒng)
  酶標(biāo)儀簡(jiǎn)單的是用濾光方式來(lái)劃分。一般來(lái)說(shuō),可以分為濾光片型和光柵型兩大類。也有一些酶標(biāo)儀里面同時(shí)裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時(shí)完成同一個(gè)檢測(cè),本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起,并沒(méi)有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。
  光柵型濾光系統(tǒng)具有使用方便,可以進(jìn)行光譜掃描,靈活性等優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)然,濾光片系統(tǒng)也有其顯著的優(yōu)勢(shì),例如價(jià)格較為便宜,檢測(cè)靈敏度高,帶寬的可選擇性,可以進(jìn)行快速的濾光片切換,可配備有自動(dòng)加樣系統(tǒng),在化學(xué)發(fā)光檢測(cè)中光線的透過(guò)率高。
  測(cè)定波長(zhǎng)
  酶標(biāo)儀有單波長(zhǎng)和雙波長(zhǎng)檢測(cè)功能。有時(shí)使用者不知在什么情況下使用單或雙波長(zhǎng)檢測(cè)。所謂的“單波長(zhǎng)”就是使用一種對(duì)顯色具最大吸收的波長(zhǎng)即450 nm或492 nm進(jìn)行比色測(cè)定;而“雙波長(zhǎng)”則除了用對(duì)顯色具最大吸收的波長(zhǎng)即450 nm或492 nm進(jìn)行比色測(cè)定外,同時(shí)用對(duì)特異顯色不敏感的波長(zhǎng)如630 nm進(jìn)行測(cè)定,酶標(biāo)儀最后打印出來(lái)的吸光度則為二者之差。630 nm波長(zhǎng)下得到的吸光度是非特異的,來(lái)自于板孔上諸如指紋、灰塵、臟物等所致的吸收。因此,在ELISA比色測(cè)定中,最好使用雙波長(zhǎng),且不必設(shè)空白孔。
  測(cè)定的吸光度范圍
  通常,酶標(biāo)儀的吸光度測(cè)定范圍在0~2.5之間即可以滿足ELISA的測(cè)定要求。早期的酶標(biāo)儀可測(cè)定的吸光度一般在0~2.5之間,但現(xiàn)在基本上都做了拓寬,可達(dá)到3.5以上,并且能保持很好的精密度與線性。因此,對(duì)于酶標(biāo)儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何。
  光學(xué)系統(tǒng)
  酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道,亦有單通道)檢測(cè),一般為硅光管或光導(dǎo)纖維,除測(cè)定通道外,有的酶標(biāo)儀還有一個(gè)參比通道,每次測(cè)定可進(jìn)行自我校準(zhǔn)。酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)功能如何,均可通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定的吸光度范圍、線性度、精密度和準(zhǔn)確度等體現(xiàn)出來(lái)。光學(xué)系統(tǒng)好的話,則上述指標(biāo)也應(yīng)較佳。測(cè)定的精密度與測(cè)定通道之間的均一性有直接關(guān)系。單通道可避免因通道不同所致的差異。
  溫育功能
  溫育功能是指酶標(biāo)儀本身能按要求自動(dòng)精確地控制儀器內(nèi)部的溫度,使得ELISA測(cè)定中微孔板條的溫育過(guò)程可在儀器內(nèi)部完成,而無(wú)需再外配溫箱。目前,只有少部分酶標(biāo)儀具有此種功能,溫育功能只是酶標(biāo)儀的一個(gè)附加功能,是否具有并不能說(shuō)明酶標(biāo)儀檔次的高低及儀器的優(yōu)劣。作為實(shí)驗(yàn)室是否選擇,則可根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的條件及需要來(lái)決定。
  軟件功能
  軟件功能是指酶標(biāo)儀所具有的對(duì)ELISA定性和定量測(cè)定及其他測(cè)定方式如酶標(biāo)動(dòng)力學(xué)、紫外和凝集等數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析并報(bào)告結(jié)果的功能。軟件功能是中高檔酶標(biāo)儀的一個(gè)非常重要的功能。如果硬件方面區(qū)別不大,則軟件就成為判定酶標(biāo)儀優(yōu)劣的惟一指標(biāo)。對(duì)于用戶來(lái)說(shuō),好的軟件功能,對(duì)實(shí)際工作會(huì)有較大的幫助。
  檢測(cè)速度
  酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度是指其完成比色測(cè)定所需要的時(shí)間。檢測(cè)速度快,有利于提高檢測(cè)的精密度,即避免由于測(cè)定過(guò)程中,因測(cè)定時(shí)間不同所致的各微孔間吸光度間的差異。目前市場(chǎng)上常見(jiàn)的酶標(biāo)儀檢測(cè)速度都非???,通常在數(shù)秒鐘內(nèi)。
  震板功能
  酶標(biāo)儀的震板功能是指酶標(biāo)儀在對(duì)ELISA板孔進(jìn)行比色測(cè)定前對(duì)其進(jìn)行振蕩混勻,使板孔內(nèi)顏色均一。目前市場(chǎng)上常見(jiàn)的酶標(biāo)儀均有震板功能,所不同的是震板方式,有的可按上下、左右或旋轉(zhuǎn)等方式及振蕩幅度等任意調(diào)節(jié);有的則較為固定。使用有震板功能的酶標(biāo)儀,在進(jìn)行ELISA測(cè)定顯色反應(yīng)完成加入終止劑后,可不必振蕩混勻,直接放人酶標(biāo)儀上測(cè)定即可。
  語(yǔ)言界面
  通常進(jìn)口的中高檔酶標(biāo)儀人機(jī)對(duì)話多采用英文。這對(duì)于某些基層實(shí)驗(yàn)室可能會(huì)存在語(yǔ)言方面的困難,從而難以最大限度地發(fā)揮酶標(biāo)儀的作用。為解決這方面的問(wèn)題,已有一些酶標(biāo)儀采用了中文界面。這樣就大大方便了廣大基層實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員的使用。
  綜上所述,盡管酶標(biāo)儀的發(fā)展極為快速,種類繁多,功能也不斷加強(qiáng),但其最根本的功用是不變的,即比色測(cè)定。大凡比色測(cè)定,其基本要求就是在一定吸光度范圍內(nèi)要有好的測(cè)定準(zhǔn)確性、線性和精密性。同樣的吸光度范圍,測(cè)定的準(zhǔn)確性、線性和精密性越好則酶標(biāo)儀亦越佳。

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