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中級(jí)會(huì)員 | 第3年

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做PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)常見的污染源都來自哪里

時(shí)間：2022/4/14閱讀：4273
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　　PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達(dá)納米級(jí)別。
　　PCR實(shí)驗(yàn)室的污染來源有哪些？
　　1.樣本間交叉感染：
　　收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴(yán)導(dǎo)致外溢；不同樣本移液時(shí)忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖；移液器等實(shí)驗(yàn)器具及耗材未及時(shí)消毒滅菌；不同樣本同時(shí)開蓋或樣本劇烈震蕩、反復(fù)吹吸導(dǎo)致氣溶膠形成擴(kuò)散，相互交叉污染。
　　2.實(shí)驗(yàn)試劑污染：
　　主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中，由于移液器、容器、陰性對(duì)照及其它試劑被核酸模板或陽(yáng)性對(duì)照污染。加樣過程中，因?yàn)镻CR試劑對(duì)溫度十分敏感，需要通過冰浴使得PCR試劑和PCR板/管處于0℃，但這個(gè)過程也充滿污染風(fēng)險(xiǎn)。
　　3.擴(kuò)增產(chǎn)物污染：
　　大量拷貝的產(chǎn)物泄漏或擴(kuò)增后的PCR反應(yīng)管意外開蓋，這是PCR反應(yīng)中最主要、最常見的污染問題。因?yàn)镻CR產(chǎn)物拷貝量大，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測(cè)數(shù)個(gè)拷貝的極限，所以極微量的PCR產(chǎn)物污染，就可形成假陽(yáng)性。
　　4.克隆質(zhì)粒污染：
　　作為陽(yáng)性質(zhì)控品的克隆質(zhì)粒外溢。
 

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