Halo-Trap 親和試劑 返回列表頁

在試管中分析 HaloTag 融合蛋白HaloTag®* 是來自玫瑰色紅球菌
的細(xì)菌鹵代烷脫鹵酶的改良變體 。它旨在與反應(yīng)性氯代烷配體形成共價(jià)鍵。當(dāng)與感興趣的蛋白質(zhì)靶點(diǎn)融合時(shí)，這個(gè)專門的反應(yīng)位點(diǎn)可以進(jìn)行各種生化和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，例如亞細(xì)胞定位、酶測定等。

生化分析的一個(gè)重要方面是直接從表達(dá)該構(gòu)建體的細(xì)胞中獲得超純 HaloTag 蛋白。Halo-Trap 是一種與瓊脂糖珠偶聯(lián)的高質(zhì)量 HaloTag 結(jié)合蛋白，用于對(duì) HaloTag 融合蛋白及其相互作用伙伴進(jìn)行超高親和力純化。使用 Halo-Trap，即使與 HaloTag 配體（如熒光染料）共價(jià)結(jié)合，也可以免疫沉淀 HaloTag 融合蛋白。HaloTag 融合蛋白甚至可以在沒有蛋白酶的情況下被洗脫！這種多功能親和試劑與免疫沉淀、Co-IP、質(zhì)譜和酶活性測量兼容。

Halo-Trap 允許細(xì)胞成像和生化純化
輸入 (I)、非結(jié)合 (FT) 和結(jié)合 (B) 級(jí)分通過 SDS-PAGE 分離，然后進(jìn)行考馬斯藍(lán)染色、蛋白質(zhì)印跡和熒光掃描。由于 Halo-Trap 在其催化中心外的表位處與 HaloTag 結(jié)合，因此未結(jié)合的 HaloTag 融合蛋白（左）和與 HaloTag TMR 等配體共價(jià)結(jié)合的 HaloTag 融合蛋白（右）均以相似的效率被捕獲。這種超高效的 1 步細(xì)胞純化使成像和純化成為可能。現(xiàn)在，使用 HaloTag 配體進(jìn)行成像處理的細(xì)胞也可以純化用于生化研究 — 使 HaloTag 系統(tǒng)與 GFP-Trap 系統(tǒng)在 GFP 表達(dá)中一樣通用。

駱駝科單域抗體就像類固醇上的 IgG

被稱為駱駝科的動(dòng)物家族（駱駝、美洲駝和羊駝）產(chǎn)生沒有輕鏈的功能性抗體，即所謂的“重鏈"抗體。這些重鏈抗體通過單個(gè)可變結(jié)構(gòu)域識(shí)別并結(jié)合其抗原。當(dāng)從它們的羧基尾部切下時(shí)，這些桶狀結(jié)構(gòu) (2x3 nm) 非常小、天然存在且完整的抗原結(jié)合片段 (MW 為 13 kDa)。這些稱為納米抗體的片段具有高特異性、低納摩爾范圍內(nèi)的親和力和亞納摩爾范圍內(nèi)的解離常數(shù)（通常比小鼠 IgG 好 10 到 100 倍）的特點(diǎn)。納米抗體的緊湊尺寸使其在高達(dá) 70°C 的溫度下極為穩(wěn)定，即使在 2M NaCl 或 0.5% SDS 中也能發(fā)揮作用。這些小而強(qiáng)大的抗體片段可用于各種*的應(yīng)用。他們將打開您的研究可能性。