大小鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)操作方法

Morris水迷宮（Morriswatermaze,MWM）實(shí)驗(yàn)是一種強(qiáng)迫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（大鼠、小鼠）游泳，學(xué)習(xí)尋找隱藏在水中平臺(tái)的一種實(shí)驗(yàn)，Morris水迷宮主要用于測(cè)試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)空間位置感和方向感（空間定位）的學(xué)習(xí)記憶能力，被廣泛應(yīng)用于學(xué)習(xí)記憶、老年癡呆、海馬/外海馬研究、智力與衰老、新藥開發(fā)/篩選/評(píng)價(jià)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、動(dòng)物心理學(xué)及行為生物學(xué)等多個(gè)學(xué)科的科學(xué)研究和計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)等領(lǐng)域，在世界上已經(jīng)得到廣泛地認(rèn)可，是醫(yī)學(xué)院校開展行為學(xué)研究尤其是學(xué)習(xí)與記憶研究的手選經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。

     在介紹實(shí)驗(yàn)步驟之前，我們需要先了解下水迷宮實(shí)驗(yàn)的兩大要素，驅(qū)動(dòng)力和考核內(nèi)容。水迷宮的驅(qū)動(dòng)力是小鼠本能對(duì)水環(huán)境的厭惡，這就會(huì)驅(qū)使小鼠想盡快離開這個(gè)環(huán)境，其中略低于水面的平臺(tái)就可以讓小鼠基本達(dá)成逃離水環(huán)境的目標(biāo)，因此小鼠有動(dòng)力盡快找到這個(gè)平臺(tái)；而考核內(nèi)容則是分析小鼠是不是能夠盡快學(xué)會(huì)用周圍的提示物（Cues）為線索找到水下平臺(tái)，絕大多數(shù)的水迷宮實(shí)驗(yàn)主要（但不限于）以下三個(gè)部分：

     1、平臺(tái)可見期實(shí)驗(yàn)（2days） 2、平臺(tái)隱藏期訓(xùn)練（5day） 3、無(wú)平臺(tái)期檢測(cè)（1day）

圖一：標(biāo)準(zhǔn)水迷宮實(shí)驗(yàn)日期表（不含適應(yīng)環(huán)境期）

     實(shí)驗(yàn)需要用到的儀器： 系統(tǒng)由水迷宮水池、攝像系統(tǒng)以及Xeye動(dòng)物行為軌跡分析系統(tǒng)組成。

實(shí)驗(yàn)方法;

     1. 獲得性訓(xùn)練

   （1）將動(dòng)物（大鼠或小鼠）頭朝池壁放入水中，放入位置隨機(jī)取東、西、南、北四個(gè)起始位置之一。記錄動(dòng)物找到水下平臺(tái)的時(shí)間（s）。在前幾次訓(xùn)練中，如果這個(gè)時(shí)間超過(guò)60s，則引導(dǎo)動(dòng)物到平臺(tái)。讓動(dòng)物在平臺(tái)上停留10s.

   （2）將動(dòng)物移開、擦干。必要時(shí)將動(dòng)物（尤其是大鼠）放在150W的白熾燈下烤5min，放回籠內(nèi)。每只動(dòng)物每天訓(xùn)練4次，兩次訓(xùn)練之間間隔15~20min,連續(xù)訓(xùn)練5d。

     2. 探查訓(xùn)練

     最后一次獲得性訓(xùn)練結(jié)束后的第二天，將平臺(tái)撤除，開始60s的探查訓(xùn)練。將動(dòng)物由原先平臺(tái)象限的對(duì)側(cè)放入水中。記錄動(dòng)物在目標(biāo)象限（原先放置平臺(tái)的象限）所花的時(shí)間和進(jìn)入該象限的次數(shù)，以此作為空間記憶的檢測(cè)指標(biāo)。

    3. 對(duì)位訓(xùn)練

     測(cè)定動(dòng)物的工作記憶（workingmemory）。探查訓(xùn)練結(jié)束后的第二天，開始維持4天的對(duì)位訓(xùn)練。將平臺(tái)放在原先平臺(tái)所在象限的對(duì)側(cè)象限，方法與獲得性訓(xùn)練相同。每天訓(xùn)練4次。每次記錄找到平臺(tái)的時(shí)間和游泳距離以及游泳速度。

    4. 對(duì)位探查訓(xùn)練

    最后一次對(duì)位訓(xùn)練的第二天進(jìn)行。方法與上述探查訓(xùn)練類似。記錄動(dòng)物60s內(nèi)動(dòng)物在目標(biāo)象限（平臺(tái)第二次所在區(qū)）所花時(shí)間和進(jìn)入該區(qū)的次數(shù)。